circRNA-6874/miR-30a/STIM2通路干预心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制研究
别自东1
郭影2
1.山东医学高等专科学校附属费县人民医院 山东临沂2734002.宁夏医科大学总医院 银川 750000
摘要：目的:探讨环状 RNA(circRNA)-6874/miR-30a/基质相互作用分子 2(STIM2)通路在缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤中的作用及机制.方法:采用 RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)和双荧光素酶报告基因实验检测 circRNA-6874 和 miR-30a的结合情况、miR-30a是否靶向调控 STIM2.心肌细胞转染或共转染后进行 H/R处理,荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测 circRNA-6874、miR-30a和 STIM2的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活力,末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测STIM2蛋白水平、生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放、荧光分光光度计检测活性氧(ROS)的生成和荧光酶标仪检测 Caspase-3 活性.结果:circRNA-6874靶向结合 miR-30a.H/R诱导心肌细胞表达circRNA-6874,其与miR-30a结合后抑制miR-30a的表达,进而促进下游靶基因STIM2的表达(P＜0.05).H/R处理明显抑制心肌细胞的存活力,促进LDH释放、ROS生成、凋亡增加和Caspase-3活性上调(P＜0.05);分别转染circRNA-6874 siRNA、miR-30a mimics或STIM2 siRNA后,H/R的上述作用明显减弱(P＞0.05);分别共转染 circRNA-6874 siRNA和 miR-30a inhibitors、miR-30a mimics和STIM2过表达载体后,H/R对心肌细胞的影响作用仍然明显(P＜0.05).结论:circRNA-6874/miR-30a/STIM2 通路通过促进氧化应激和凋亡促进 H/R诱导的心肌细胞损伤.
关键词：缺氧/复氧损伤环状RNAmiR-30a基质相互作用分子2心肌细胞
资助基金：宁夏自然科学基金项目(No.2020AAC03366)
论文发表日期：2023-06-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1964-1970 )
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