lncRNA Hotairm1靶向miR-129-5p对缺氧/复氧大鼠心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响
赵丽娜1
徐明2
侯静3
1.华北理工大学附属医院 河北唐山 0630002.沧州市人民医院3.开滦总医院林西医院
摘要：目的:探讨长链非编码 RNA(lncRNA)HOXA转录本反义 RNA1(Hotairm1)调控 miR-129-5p对缺氧/复氧(H/R)大鼠心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响.方法:体外培养 H9c2 大鼠心肌细胞,构建心肌细胞 H/R 模型.实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测 H/R诱导后 lncRNA Hotairm1和 miR-129-5p的表达水平.用脂质体转染技术分别构建抑制 lncRNA Hotairm1 表达和过表达 miR-129-5p的 H9c2心肌细胞,H/R诱导后,噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况;试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量以及上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡关键蛋白Cleaved Caspase-3及 Cleaved Caspase-9的表达;用双荧光素酶报告基因实验验证 lncRNA Hotairm1 是否靶向 miR-129-5p,并分析同时抑制 lncRNA Hotairm1和 miR-129-5p表达对 H9c2 心肌细胞增殖、凋亡及氧化应激的影响.结果:H/R诱导后的 H9c2 细胞 lncRNA Hotairm1基因表达量明显增加,miR-129-5p基因表达量明显降低(P＜0.05).与 H/R模型组比较,沉默 lncRNA Hotairm1 或过表达miR-129-5p处理后的 H9c2细胞存活率明显提高(P＜0.05),凋亡率明显降低(P＜0.05),细胞中 MDA含量和 ROS水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),LDH活性明显降低(P＜0.01),凋亡蛋白 Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9的表达量明显减少(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验证实H9c2细胞中lncRNA Hotairm1靶向负调控miR-129-5p的表达(P＜0.05).抑制miR-129-5p表达能够部分逆转沉默lncRNA Hotairm1对H/R心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响(P＜0.05或P＜0.01).结论:沉默lncRNA Hotairm1 通过靶向 miR-129-5p可减轻 H/R诱导的心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡,发挥心肌保护作用.
关键词：氧化应激损伤缺氧/复氧长链非编码RNA Hotairm1lncRNA Hotairm1miR-129-5p凋亡
资助基金：河北省医学科学研究课题(No.20201225)
论文发表日期：2023-06-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1971-1976 )
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