基于RNA-Seq技术探讨洋参芎芍方改善RAW 264.7巨噬细胞代谢及炎症反应的机制
王红芹
徐凤芹
周庆兵
刘玥
梅俊
刘晓林
刘藜
张颖
中国中医科学院西苑医院,北京 100091
摘要：目的:探讨洋参芎芍方对 RAW264.7 巨噬细胞代谢、炎症反应的影响及其可能的机制.方法:应用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测 RAW264.7巨噬细胞活性;分别使用葡萄糖、总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)试剂盒检测巨噬细胞葡萄糖摄取率、TC、FC;酶联免疫吸附法(ELISA)检测RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;油红O染色法检测RAW264.7巨噬细胞脂质积聚;真核 RNA测序(RNA-seq)技术检测 RAW264.7巨噬细胞基因表达,通过蛋白免疫印迹法(Westren Blot)检测洋参芎芍方对RAW264.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体-gamma(PPAR-γ)蛋白表达的影响.结果:与空白组比较,洋参芎芍方在 25～6400 mg/L梯度范围内均促进 RAW264.7巨噬细胞的活性(P<0.01);与空白组比较,模型组可增加 RAW264.7 巨噬细胞的葡萄糖摄取率、TC与 FC浓度、TNF-α水平及脂质积聚(P<0.05),与模型组比较,洋参芎芍中剂量组、高剂量组可减少 RAW264.7 巨噬细胞葡萄糖摄取率、TC与 FC浓度、TNF-α水平及脂质积聚(P<0.05);RNA测序结果表明过 PPAR-γ信号通路是调控巨噬细胞代谢的关键通路,洋参芎芍方(400 mg/mL)可降低 PPAR-γ蛋白表达,Westren Blot结果显示模型组 PPAR-γ蛋白表达降低,洋参芎芍方可增加 PPAR-γ蛋白表达(P<0.05).结论:洋参芎芍方可能通过增加 PPAR-γ蛋白表达改善巨噬细胞代谢及炎症反应.
关键词：糖尿病动脉粥样硬化益气活血方巨噬细胞糖脂代谢过氧化物酶体增殖物激活受体-gammaPPAR-γ实验研究
资助基金：国家自然科学基金(No.81774143)中国中医科学院科技创新工程重大攻关面上项目(No.CI2021A01407)
论文发表日期：2023-07-16
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 2568-2575 )
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