miR-21通过PTEN/AKT/TFEB通路对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响
郭俊玲
吴曼
李颖
陈智
唐山市人民医院 河北唐山 063000
摘要：目的:探讨 microRNA-21(miR-21)对心肌梗死诱导的心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响机制.方法:SD大鼠采用结扎左冠状动脉前降支法建立心肌梗死模型,造模成功后分为模型组、重组腺相关病毒血清型 9(rAAV9)-NC组、rAAV9-anti-miR-21 组、rAAV9-anti-miR-21+BpV组,每组 12 只;另取 12 只大鼠作为假手术组.rAAV9-anti-miR-21 组、rAAV9-NC 组分别尾静脉注射含 miR-21 antagomir及其阴性对照的腺病毒进行干预,rAAV9-anti-miR-21+BpV组大鼠尾静脉注射 rAAV9-anti-miR-21 的同时以 0.2 mg/kg腹腔注射磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)抑制剂 BpV,假手术组和模型组经腹腔和尾静脉注射等体积的生理盐水,每日 1 次,连续干预 2周.经胸超声心动图检测大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD),并计算左心室射血分数(LVEF)和短轴缩短分数(FS);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清氨基末端脑钠尿肽前体(NT-proBNP)水平;取左心室并称重,计算左心室质量指数(LVMI);马松(Masson)染色观察心肌组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测左心室组织miR-21、PTEN、Collagen Ⅰ和 Collagen Ⅲ表达水平;透射电子显微镜观察心肌组织自噬情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测左心室组织自噬和 PTEN/蛋白激酶 B(AKT)/转录因子 EB(TFEB)通路相关蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠 LVEDD、LVESD、血清 NT-proBNP水平、LVMI、心肌胶原体积分数(CVF)、miR-21 和 Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的 mRNA水平以及 p62 蛋白水平、p-AKT/AKT比值升高,LVEF、FS、PTEN的 mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及 LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平下降(P<0.05);与模型组比较,rAAV9-anti-miR-21 组大鼠 LVEDD、LVESD、血清 NT-proBNP 水平、LVMI、CVF、miR-21 和 Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的 mRNA水平、p62蛋白水平、p-AKT/AKT比值下降,LVEF、FS、PTEN的mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平升高(P<0.05);而敲低miR-21基础上应用PTEN抑制剂下调PTEN表达可降低自噬,减弱敲低miR-21对心力衰竭大鼠心肌纤维化的抑制作用.结论:miR-21在心肌梗死后心力衰竭大鼠模型中的高表达可能通过下调 PTEN、激活 AKT、抑制 TFEB的核易位,进而抑制自噬,促进心肌纤维化.
关键词：心肌梗死心力衰竭microRNA-21心肌纤维化自噬磷酸酶-张力蛋白同源物基因/蛋白激酶B/转录因子EB通路实验研究
资助基金：河北省卫生健康委员会项目(No.20210316)
论文发表日期：2023-08-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2766-2772 )
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