花青素-3-葡萄糖苷干预过氧化氢诱导的H9c2细胞损伤的作用机制
袁晓丽1
江莉1
黄莉莉1
胡斌2
1.绵阳市中心医院 四川绵阳 6210002.西南医科大学附属医院
摘要：目的:探究花青素-3-葡萄糖苷干预过氧化氢(H2O2)诱导的 H9c2细胞损伤的作用机制.方法:将 H9c2 细胞暴露于不同浓度H2 O2中 4、8、12 h诱导细胞毒性,同时以不同浓度花青素-3-葡萄糖苷处理细胞,并设置阳性对照组(1.5 mg/mL益气活血颗粒),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,Hoechst 33342染色和流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹法检测细胞中解偶联蛋白 2(UCP2)表达,二氢乙锭(DHE)染色检测活性氧(ROS)含量,蛋白免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关 X蛋白(Bax)及切割后半胱天冬酶 3(Cleaved Caspase-3)的表达.结果:600 μmol/L的 H2 O2 处理 4h为最佳造模条件,50.00 μmol/L为花青素-3-葡萄糖苷最适药物干预浓度.与对照组比较,H2 O2 组细胞凋亡率、Bax/Bcl-2及Cleaved Caspase-3表达明显升高,UCP2 mRNA及蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与 H2 O2 组比较,H2 O2+花青素-3-葡萄糖苷组和 H2O2+益气活血颗粒组细胞凋亡率、Bax/Bcl-2及 Cleaved Caspase-3表达明显降低,UCP2 mRNA及蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).shRNA-3可明显降低细胞中 UCP2 蛋白表达,与 H2 O2 组比较,H2 O2+shRNA-3 组 UCP2、Bcl-2 蛋白表达明显降低,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达及 ROS含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与 H2 O2+shRNA-3 组比较,花青素-3-葡萄糖苷处理后 UCP2、Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax、Cleaved Caspase-3 蛋白表达 ROS含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:花青素-3-葡萄糖苷对 H2 O2 诱导的 H9c2细胞凋亡有显著的保护作用,其机制可能与上调 UCP2 表达,从而降低 Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3表达,清除 ROS有关.
关键词：H9c2心肌细胞氧化损伤花青素-3-葡萄糖苷细胞凋亡活性氧实验研究
资助基金：四川省科技厅科技计划重点研发基金资助项目(No.2019SZYZF015)
论文发表日期：2023-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 3146-3153 )
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