DLEU1通过调控p38/JNK信号通路促进高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖和血管重塑的实验研究
冉娅娅
邓功建
宋欢欢
四川省达州市中心医院(四川达州 643000)
摘要：目的:探讨淋巴细胞白血病缺失基因 1(DLEU1)促进高血压大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和血管重塑的机制及相关信号通路.方法:将 12只 DLEU1转基因大鼠(DTRs)随机分为 DTRs组、p38组、JNK组,每组 4只,分别经腹腔注射二甲基亚砜溶液、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂 SB203580、JNK抑制剂SP600125,并以Wistar大鼠(4只)为对照组,采用苏木精-伊红(HE)染色确定主动脉、心脏和肾脏的形态结构.通过转染 DLEU1 过表达质粒,构建 DLEU1 过表达的 VSMCs,同时给予SB203580、SP600125干预,通过溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)实验、细胞周期及迁移实验比较不同干预细胞的生物活性的差异.结果:DTR组大鼠血管腔面积显著减小、中膜增厚,肾组织中可见小动脉增生,血管壁和肾小球增厚,p38 及 JNK抑制剂可减轻 DLEU1 介导的血管中膜增厚的效应,增加中膜/管腔面积比,肾脏小动脉的病理改变也有所改善.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测显示,转染过表达 DLEU1质粒后,VSMCs中 DLEU1的相对表达量显著提高(P<0.05),表明细胞模型构建成功.蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测发现,磷酸化 p38和 JNK蛋白的表达上调.DLEU1过表达导致细胞增殖率显著增加.经 p38 和 JNK抑制剂处理后,细胞增殖率均有所下降(P<0.05).p38和 JNK抑制剂可显著阻断细胞周期,处理后,G0/G1 期细胞比例均有所上升.过表达 DLEU1可显著提高细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2 和 MMP-9 的蛋白表达水平,而阻断 p38 和 JNK可部分消除 DLEU1 对MMP-2和 MMP-9蛋白表达的促进作用.Western Blot检测显示,DLEU1过表达细胞骨桥蛋白(OPN)蛋白表达水平明显上调,平滑肌 22α(SM-22α)蛋白表达显著下调,经 p38抑制剂和 JNK抑制剂干预后,OPN蛋白表达水平明显降低,SM-22α蛋白表达水平上调.结论:高血压时 DLEU1介导的 VSMCs增殖和表型改变需要 p38/JNK通路介导.
关键词：高血压淋巴细胞白血病缺失基因 1DLEU1血管平滑肌细胞p38/JNK信号通路血管重塑实验研究
论文发表日期：2023-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3925-3930 )
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