LncRNA FGD5-AS1靶向miR-16-5p/CREB1轴减轻缺氧/复氧诱导大鼠H9c2心肌细胞凋亡的机制研究
谢小芳
赵展庆
符妹垂
海南西部中心医院(海南儋州 571700)
摘要：目的:探究长链非编码 RNA(LncRNA)FGD5反义 RNA1(FGD5-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠 H9c2 心肌细胞凋亡的影响以及对微小 RNA-16-5p/cAMP响应元件结合蛋白 1(miR-16-5p/CREB1)轴的调节机制.方法:将 H9c2 细胞分为对照组和 H/R组(缺氧 6h,复氧 6h),然后将 H/R组细胞分别进行转染,分为 oe-NC组、oe-FGD5-AS1 组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic-NC组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic组.实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测细胞中 FGD5-AS1、miR-16-5p、CREB1的 mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定裂解凋亡蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;CCK-8法测定细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶活性实验分别验证 miR-16-5p和 FGD5-AS1、CREB1的靶向关系.结果:与对照组比较,H/R组细胞中 FGD5-AS1 和 CREB1 的 mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2 蛋白表达降低(P<0.05),miR-16-5p mRNA水平、细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与H/R组和oe-NC组比较,转染过表达 FGD5-AS1基因的 H9c2细胞中 FGD5-AS1和 CREB1的 mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白表达增高,凋亡率及 miR-16-5p、cleaved Caspase-3、Bax水平下降(P<0.05).双荧光素酶活性实验验证了 FGD5-AS1、CREB1 均与 miR-16-5p有结合位点.结论:过表达 FGD5-AS1可能通过靶向下调 miR-16-5p表达,上调 CREB1表达,抑制 H/R诱导的 H9c2心肌细胞凋亡.
关键词：缺氧/复氧FGD5反义RNA 1微小RNA-16-5p/cAMP响应元件结合蛋白1轴心肌细胞凋亡
资助基金：海南省自然科学基金项目(No.820MS154)
论文发表日期：2024-05-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1585-1590 )
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