马钱苷调节AKT/AMPK/Nrf2通路改善氧葡萄糖剥夺/复氧诱导的神经元铁死亡的机制研究
杨祎
贾健
魏小利
苟平平
袁媛
高李
宝鸡市中心医院(陕西宝鸡 721000)
摘要：目的:探讨马钱苷通过调节蛋白激酶 B(AKT)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-E2 相关因子 2(Nrf2)通路改善氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元铁死亡的机制.方法:将神经元分为对照组、OGD/R组、OGD/R+L-马钱苷组、OGD/R+M-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷+ML385组.透射电子显微镜观察神经元线粒体形态;检测铁含量、谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)活性、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG),还原型辅酶Ⅱ(NADPH)/辅脱氢酶Ⅱ(NADP+)及乳酸脱氢酶(LDH)含量;使用 CM-H2DCFDA、C11-BODIPY581/591 分别检测细胞内和脂质活性氧(ROS)水平;四唑盐(MTT)试剂盒检测细胞活性;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测 B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、Bcl相关 X蛋白(Bax)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶 3(cleaved Caspase-3)、磷酸化的蛋白激酶 B(p-AKT)/AKT、磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)/AMPK、Nrf2蛋白表达.结果:OGD/R组神经元线粒体出现碎片化现象,嵴减少,线粒体膜密度有所增加.与对照组比较,OGD/R组GSH/GSSG、NADPH/NADP+、SOD、GPX4相对活性、细胞活力以及Bcl-2水平、p-AKT/AKT、p-AMPK/AMPK、Nrf2水平下降(P<0.05),Fe2+含量、细胞内ROS水平、脂质ROS水平以及 4-HNE、MDA水平、LDH释放量、Bax以及cleaved Caspase-3水平上升(P<0.05);马钱苷处理后神经元线粒体中的线粒体嵴变得较为完整,碎片化现象消失,OGD/R+L-马钱苷组、OGD/R+M-马钱苷组、OGD/R+H-马钱苷组较 OGD/R 组 GSH/GSSG、NADPH/NADP+、SOD、GPX4 相对活性、细胞活力以及 Bcl-2 水平、p-AKT/AKT、p-AMPK/AMPK、Nrf2水平上升(P<0.05),Fe2+含量、细胞内ROS水平、脂质ROS水平以及4-HNE、MDA水平、LDH释放量、Bax以及 cleaved Caspase-3水平下降(P<0.05),且随着马钱苷剂量的增加,改善效果更显著;OGD/R+H-马钱苷+ML385组以上指标与OGD/R组趋势一致.结论:马钱苷可能通过调节AKT/AMPK/Nrf2通路改善OGD/R诱导的神经元铁死亡.
关键词：氧葡萄糖剥夺/复氧铁死亡马钱苷蛋白激酶B/腺苷酸活化蛋白激酶/核因子-E2相关因子2通路神经元
资助基金：宝鸡市卫生健康委员会科研课题(No.2020-012)
论文发表日期：2024-05-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1597-1603 )
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