隐丹参酮调节TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路对高糖诱导的心肌细胞焦亡的影响
武禹佳
武文印
李艳
董印宏
唐山市中医医院(河北唐山 063000)
摘要：目的:探讨隐丹参酮调节Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路对高糖诱导的心肌细胞焦亡的影响.方法:将H9c2细胞分为对照组(正常葡萄糖5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖33 mmol/L)、2.5 μmol/L隐丹参酮组(葡萄糖33 mmol/L+2.5 μmol/L隐丹参酮)、5 μmol/L隐丹参酮组(葡萄糖33 mmol/L+5 μmol/L隐丹参酮)和脂多糖(LPS)组(葡萄糖33 mmol/L+5μmol/L隐丹参酮+1μg/mL TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活剂LPS),各组细胞培养在相应的培养基中48 h.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率;2',7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)法检测细胞活性氧(ROS)水平;半胱氨酸天冬氨酸酶-1抑制剂(FLICA)-半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞焦亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞GSDMD蛋白N端片段(GSDMD-N)、TLR4、NLRP3、磷酸化 NF-κB p65(p-NF-KB p65)、NF-κB p65、Cleaved Caspase-1、Caspase-1 蛋白表达.结果:与对照组比较,高糖组H9c2细胞存活率下降(P＜0.05),细胞ROS水平、焦亡细胞比例、细胞上清IL-1β和IL-18水平及细胞TLR4、NLRP3、p-NF-KB p65/NF-KB p65、GSDMD-N、Cleaved Caspase-1/Caspase-1 蛋白表达升高(P＜0.05);与高糖组比较,2.5 μmol/L 隐丹参酮组、5 μmol/L 隐丹参酮组 H9c2细胞存活率升高(P＜0.05),细胞ROS水平、焦亡细胞比例、细胞上清IL-1β和IL-18水平及细胞TLR4、NLRP3、p-NF-κB p65/NF-κB p65、GSDMD-N、Cleaved Caspase-1/Caspase-1蛋白表达降低(P＜0.05).TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活剂LPS可逆转隐丹参酮对高糖诱导细胞增殖和焦亡的抑制作用.结论:隐丹参酮可抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻高糖诱导的心肌细胞焦亡.
关键词：心肌细胞隐丹参酮Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3信号通路高糖焦亡实验研究
资助基金：河北省中医药管理局中医药类科研计划课题(No.2019206)
论文发表日期：2024-07-16
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2553-2558 )
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