梓醇-川芎嗪方调控STAT3改善阿尔茨海默病神经可塑性的机制研究
陈慧泽1
邓楚珺1
孟泽宇2
孟胜喜1
1.上海交通大学医学院附属上海第六人民医院 上海 2002332.黑龙江中医药大学第二临床医学院 哈尔滨 150040
摘要：目的:探讨梓醇-川芎嗪(CT)方对阿尔茨海默病(AD)的作用及转录激活蛋白3(STAT3)的影响.方法:将野生型C57BL/6J小鼠作为对照组(Control),同时将粉样前体蛋白/早老素1双转染小鼠按照随机数字表法随机分为模型组(Model)、低剂量梓醇-川芎嗪方组(CT-L)、高剂量梓醇-川芎嗪方组(CT-H),每组6只.CT-L组和CT-H组分别给予梓醇-川芎嗪方药50、100 mg/kg灌胃处理.Control组和Model组均给予等体积的生理盐水灌胃.每日1次,连续灌胃8周.水迷宫实验探索梓醇-川芎嗪对AD小鼠学习记忆能力的影响,免疫组化检测海马组织中生长相关蛋白43(GAP-43)的表达.海马神经元HT-22细胞分为空白对照组(Control组)、模型组(Model组)、低剂量梓醇-川芎嗪方组(CT-L组)、高剂量梓醇-川芎嗪方组(CT-H组)、STAT 3敲除+梓醇-川芎嗪方组(CT+siSTAT 3组).通过Aβ1-42构建体外AD模型,通过转染siSTAT3构建STAT 3沉默的神经元模型,并加入高、低剂量的梓醇-川芎嗪方培养24 h,细胞活性检测(CCK-8)检测细胞活力,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测Cyclin D1、Ki-67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、NF200、GAP-43、STAT3和磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平,Brdu检测细胞增殖,流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色检测细胞凋亡.结果:梓醇-川芎嗪方可以明显缩短APP/PS1双转染小鼠的逃避潜伏期,提高目标象限停留时间和目标象限停留次数,上调海马组织GAP-43的表达,其中高剂量的梓醇-川芎嗪方作用更显著(P<0.05或P<0.01).梓醇-川芎嗪方可以恢复AD模型细胞的活力和增殖能力,上调Cyclin D1、Ki-67、NF200、GAP-43和STAT3蛋白的表达,下调凋亡相关蛋白Bax的表达并恢复了抗凋亡Bcl-2蛋白的水平,其中高剂量梓醇-川芎嗪方的作用更显著(P<0.05或P<0.01).而沉默STAT3逆转了梓醇-川芎嗪方对AD神经元增殖和对NF200、GAP-43蛋白表达的促进作用,阻断了梓醇-川芎嗪方对AD神经元的抗凋亡作用(P<0.05或P<0.01).结论:梓醇-川芎嗪方可以显著改善AD模型小鼠的认知和记忆能力,且其效应具有剂量依赖性.其作用机制可能与促进神经元细胞的增殖,降低凋亡,调控STAT3的表达从而促进神经元的可塑性有关.
关键词：阿尔茨海默病梓醇-川芎嗪方转录激活蛋白3轴突可塑性实验研究
资助基金：上海市第六人民医院脑科学与类脑研究脑项目(No.ynnkxyb202415)上海市第六人民医院医疗服务能级提升工程临床医疗技术骨干队伍培育项目(No.20220213)上海市第六人民医院院级课题(No.ynxg202218)上海交通大学医学院大学生创新训练计划项目(No.1723Z002)上海交通大学医学院大学生创新训练计划项目(1824011)上海市进一步加快中医药传承创新发展三年行动计划项目(2021;2023;No.ZY(2021-2023)-0205-04)华东片区及市级中医专科专病联盟建设项目(No.ZY(2021-2023)-0302)
论文发表日期：2024-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 3899-3906 )
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