麝香保心丸基于AMPK/PGC-1α通路调控线粒体功能改善心肌能量代谢的实验研究
宋晓龙
潘仁友
顾月星
宋峻
涂冬云
伍德明
倪其猛
南京中医药大学盐城附属医院,盐城市中医院(江苏 盐城 224001)
摘要：目的:观察麝香保心丸对冠心病心肌能量代谢的影响及作用机制.方法:实验分为对照组(Control组,H9c2心肌细胞)、模型组(Model组,缺氧/复氧处理H9c2心肌细胞)、麝香保心丸低剂量组(SBP-L组,100 μg/L麝香保心丸处理)、麝香保心丸中剂量组(SBP-M组,200 μg/L麝香保心丸处理)、麝香保心丸高剂量组(SBP-H组,400 μg/L麝香保心丸处理)和曲美他嗪组(TMZ组,曲美他嗪处理).采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活性,腺苷5′-三磷酸生物发光测定试剂盒检测线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量,5,5′,6,6′-四氯-1,1′,3,3′-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物(JC-1)染色测定试剂盒检测线粒体膜电位;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色法检测细胞活性氧;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;细胞凋亡检测试剂盒对细胞凋亡进行评估.采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞凋亡相关基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)和胱天蛋白酶9(Caspase-9)表达;通过Western Blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)和二磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)表达.选择SBP-H组进行AMPK抑制剂(多索吗啡肽,CC)干预,检测细胞凋亡、线粒体ATP含量及PGC-1α、AMPK表达.结果:模型组细胞活性、线粒体ATP含量、线粒体膜电位、SOD含量、GSH-Px含量、PGC-1α和磷酸化AMPK(p-AMPK)表达显著下降,ROS含量、MDA含量、细胞凋亡显著上升(P＜0.05).SBP-L组、SBP-M组、SBP-H组、TMZ组上述细胞功能和蛋白质表达被逆转,且SBP-H组和TMZ组作用显著.SBP-H组加入AMPK抑制剂后,细胞凋亡抑制、PGC-1 α和p-AMPK表达上调被逆转.结论:麝香保心丸通过AMPK/PGC-1α通路促进线粒体功能,进而改善心肌细胞能量代谢.
关键词：冠心病麝香保心丸H9c2心肌细胞二磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α线粒体能量代谢实验研究
资助基金：中华中医药学会横向课题项目(No.2022HH-005)
论文发表日期：2025-03-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 848-856 )
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