基于网络药理学、分子对接、动物实验验证分析炙甘草汤治疗心律失常的作用机制
郭长学1
高洋2
赵晓2
秦合伟2
1.漯河市中心医院(河南 漯河 462300)2.河南中医药大学(郑州 450002)
摘要：目的:基于网络药理学、分子对接技术并结合动物实验验证,分析炙甘草汤治疗心律失常的作用机制.方法:通过TCSMP数据库获得炙甘草汤中炙甘草、人参、桂枝、酸枣仁、大枣、生地、阿胶的活性成分及其靶点,利用Gene Cards数据库获取心律失常的相关靶点,制作韦恩图获取二者共有靶点,通过STRING数据库分析蛋白质相互作用(PPI),构建PPI网络图,通过网络拓扑分析筛选核心靶点,并对核心靶点进行基因本体(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,采用Cytoscape 3.9.1软件绘制炙甘草汤药物-活性成分-靶点多维关联可视化网络,并对网络分析获得关键活性成分;采用AutoDock对筛选出关键活性成分和靶标进行分子对接验证;进而采用左侧颈外静脉注射乌头碱诱导心律失常,造模成功后采用炙甘草汤进行干预,连续干预15 d后采用生物实验机能系统记录大鼠心电图,主要监测并记录室性心动过速发生率和持续时间、心室颤动持续时间和发生率.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测大鼠血液和主动脉的核心靶标水平.结果:共分析出165种化学成分,其中槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇、富马碱等5个排名前5位的关键活性成分,预测靶点去重后获得392个靶点,与疾病相关靶点1 228个进行交集映射,获得95个靶标,蛋白互作网络筛选出以白细胞介素6(IL6)、蛋白激酶B1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL1B)、环氧合酶2(PTGS2)、缺氧诱导因子1(HIF-1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)为主的20个核心靶点.GO功能富集分析生物过程条目647个,细胞组分条目74个,分子功能条目88个,KEGG共富集167条通路.分子对接结果显示5个关键化合物和6个核心靶标能够直接相互作用.经过动物实验结果表明,炙甘草汤能够明显改善大鼠心律失常(潜伏时间、维持时间、心率、心律失常发生率)情况(P＜0.05),降低大鼠外周血清中AKT1、TNF、IL1B水平(P＜0.05),降低大鼠心室组织HIF-1α、PTGS2、MMP9 mRNA和蛋白水平(P＜0.05).结论:炙甘草汤改善心律失常的作用机制可能与调控HIF-1A通路抑制关键靶标HIF-1α、PTGS2、MMP9、AKT1、TNF、IL1B的表达有关.
关键词：心律失常炙甘草汤网络药理学分子对接实验验证
论文发表日期：2025-06-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 1625-1635 )
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