基于miR-20a-5p/CCND2轴探讨达格列净干预慢性心力衰竭大鼠的作用机制
韩青
刘晓娟
任小乾
邱毅
刘雪
邢金梅
保定市第二医院(河北 保定 071000)
摘要：目的:探讨达格列净调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)/细胞周期蛋白D2(CCND2)轴干预慢性心力衰竭大鼠的作用机制.方法:建立慢性心力衰竭大鼠模型,分为假手术组(Sham组)、模型组、达格列净低剂量组(DAPA-L组)、达格列净高剂量组(DAPA-H组)、达格列净高剂量+miR-20a-5p激动剂阴性对照组(DAPA-H+agomir-NC组)、达格列净高剂量+miR-20a-5p激动剂组(DAPA-H+miR-20a-5p-agomir组).超声心动图评估心脏功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态;Masson染色评估心肌组织纤维化水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-20a-5p和CCND2的表达变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测抗体切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和CCND2蛋白水平.结果:与Sham组相比,模型组心肌组织部分细胞损伤坏死、结构紊乱,心肌细胞肿胀,有大量的炎性细胞浸润;左室舒张压(LVDP)、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率,胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显增加(P＜0.05);左室收缩压(LVSP)、左室射血分数(LVEF)水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显降低(P＜0.05).与模型组相比,DAPA-L组和DAPA-H组心肌纤维排列逐渐规则,心肌细胞肿胀、坏死及炎性细胞浸润减少;LVDP、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率、胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显降低(P＜0.05);LVSP和LVEF水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显增加(P＜0.05).与DAPA-H+agomir-NC组相比,DAPA-H+miR-20a-5p-agomir组大鼠心肌细胞肿胀、坏死及炎性细胞浸润增大,心肌纤维排列较紊乱,LVDP、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率、胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显增加(P＜0.05),LVSP和LVEF水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显降低(P＜0.05).结论:达格列净通过下调miR-20a-5p表达,促进CCND2表达改善大鼠慢性心力衰竭.
关键词：慢性心力衰竭达格列净微小RNA-20a-5p细胞周期蛋白D2实验研究
资助基金：保定市科技计划项目(No.2241ZF191)
论文发表日期：2025-08-10
在线出版日期：2025-08-20（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 2298-2306 )
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