LncRNA H19靶向miR-766-3p对缺氧复氧诱导的大鼠心肌细胞株H9c2凋亡的影响
邢智
李辉
邱海棠
迪丽胡玛尔·阿布来提
朱梦柏
高颖
新疆医科大学第一附属医院(乌鲁木齐 830054)
摘要：目的:观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)H19对缺氧复氧诱导的大鼠心肌细胞株H9c2凋亡的影响,并探讨其对微小核糖核酸(miR-766-3p)的靶向调控作用.方法:取大鼠心肌细胞株H9c2培养、分组.除空白组和正常组外,LncRNA H19上调组、LncRNA H19上调对照组、LncRNA H19下调组、LncRNA H19下调对照组、miR-766-3p上调组、miR-766-3p上调对照组、miR-766-3p下调组、miR-766-3p下调对照组分别转染pcDNA3.1-H19、pcDNA3.1-control、si-H19、si-NC、miR-766-3p mimics、miR mimics-NC、miR-766-3p inhibitor、miR inhibitor-NC.除正常组外均缺氧24 h、复氧6 h.实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定各组LncRNA H19、miR-766-3p表达;原位末端标记法(TUNEL)检测各组细胞凋亡率;RT-qPCR检测各组人cAMP激活的鸟苷酸交换蛋白(Epac-1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶3(Capase3)基因表达;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组上述蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验探讨LncRNA H19与miR-766-3p的关系.结果:与正常组比较,空白组LncRNA H19、Epac-1表达均下降(P＜0.05),miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率均升高(P＜0.05);与空白组比较,LncRNA H19上调组LncRNA H19、Epac-1 表达均升高(P＜0.05),miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率均下降(P＜0.05);LncRNA H19下调组LncRNA H19、Epac-1表达均下降(P＜0.05),miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率均升高(P＜0.05);miR-766-3p上调组Epac-1表达下降(P＜0.05),miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率均升高(P＜0.05);miR-766-3p下调组Epac-1表达升高(P＜0.05),miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率均下降(P＜0.05).LncRNA H19组miR-766-3p WT相对荧光素酶活性低于转染对照组(P＜0.05),且LncRNA H19与miR-766-3p存在结合位点.结论:缺氧复氧导致大鼠心肌细胞株H9c2 LncRNA H19、Epac-1表达下降,而miR-766-3p、Bcl-2、Capase3表达与细胞凋亡率升高,但上调LncRNA H19可靶向抑制miR-766-3p减少细胞凋亡.
关键词：缺氧复氧心肌细胞凋亡长链非编码核糖核酸H19微小核糖核酸-766-3p实验研究
资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(No.2022D01C766)新疆维吾尔自治区研究生科研创新项目(No.XJ2023G157)
论文发表日期：2025-08-25
在线出版日期：2025-09-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2461-2467 )
英文信息