右美托咪定调控自噬-ROS-NLRP3途径对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的机制研究
刘凯
王震
驻马店市中心医院(河南 驻马店 463000)
摘要：目的:探究右美托咪定(DEX)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的作用机制.方法:将100只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术(Sham)组、CIRI组、自噬诱导剂(RAPA)组、DEX+自噬抑制剂(3-MA)组,每组20只.除Sham组外,其余各组大鼠均采用线栓法构建大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型.于再灌注时,DEX组大鼠于即刻腹腔注射100 μg/kg的DEX,RAPA组大鼠即刻腹腔注射1 mg/kg的RAPA,DEX+3-MA组大鼠于即刻腹腔注射100 μg/kg DEX和15 mg/kg 3-MA.Sham和CIRI组大鼠腹腔注射等量的生理盐水.于再灌注24 h后,对各组大鼠进行神经功能缺失评分;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测脑梗死体积;苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织形态结构;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)染色法检测神经元细胞凋亡;透射电镜观察自噬小体变化;免疫荧光法检测神经元微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测脑组织LC3和NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白表达;二氢乙锭(DHE)荧光法检测脑组织活性氧(ROS)水平.结果:与Sham组相比,CIRI组大鼠脑组织出现明显的病理损伤,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经元细胞凋亡指数均显著升高(P＜0.05);神经元细胞自噬小体数量、LC3阳性表达率、脑组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、NLRP3、ASC、Caspase-1、白细胞介素(IL)-1β、IL-18蛋白表达及ROS水平均显著上调(P＜0.05).与CIRI组相比,DEX组和RAPA组大鼠脑组织病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经元细胞凋亡指数均显著降低(P＜0.05);神经元细胞自噬小体数量、LC3阳性表达率、脑组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均显著升高(P＜0.05);NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达及ROS水平均显著降低(P＜0.05).与DEX组相比,DEX+3-MA组大鼠能够抑制DEX对CIRI大鼠指标的改变(P＜0.05),逆转DEX对CIRI的保护作用.结论:DEX能够改善CIRI大鼠神经功能损伤,其机制与诱导神经元自噬,降低ROS水平,抑制NLRP3炎症小体活化相关.
关键词：脑缺血再灌注损伤右美托咪定自噬NOD样受体蛋白3实验研究
资助基金：河南省高等学校重点科研项目(No.23B320122)
论文发表日期：2025-09-10
在线出版日期：2025-09-18（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 2623-2632 )
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