miR-124-3p靶向调节上皮膜蛋白1对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响
段平
张璇
上海中医药大学附属第七人民医院(上海 200137)
摘要：目的:探究miR-124-3p对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的作用以及与上皮膜蛋白1(EMP1)的靶向调节机制.方法:利用左前降支(LAD)冠状动脉结扎法制备AMI大鼠模型,随后将大鼠随机分为假手术组、模型组、miR-NC组、miR-124-3p inhibitor组、miR-124-3p inhibitor+si-NC组、miR-124-3p inhibitor+si-EMP1组,每组20只.采用超声心动图检测各组大鼠心脏功能指标;红四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠心肌组织的病理变化;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、EMP1蛋白表达;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠心肌组织中miR-124-3p和EMP1 mRNA的表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-124-3p与EMP1的靶向关系.结果:与假手术组相比,模型组左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、心肌梗死面积、细胞凋亡率,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达,miR-124-3p水平升高(P＜0.05);左室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF),Bcl-2表达,EMP1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).与模型组相比,miR-124-3p inhibitor组LVESD、LVEDD、心肌梗死面积、细胞凋亡率,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达,miR-124-3p水平降低(P＜0.05);LVFS、LVEF,Bcl-2、EMP1 mRNA及蛋白表达升高(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验发现,与miR-124-3p mimic-NC和EMP1-WT共转染相比,miR-124-3p mimic和EMP1-WT共转染的细胞相对荧光素酶活性降低(P＜0.05);进一步在抑制miR-124-3p的基础上进行EMP1敲低实验发现,抑制miR-124-3p对AMI大鼠心肌组织的保护作用被逆转(P＜0.05).结论:抑制miR-124-3p可以靶向上调EMP1来抑制AMI大鼠的心肌细胞凋亡.
关键词：急性心肌梗死miR-124-3p上皮膜蛋白1心肌细胞凋亡心脏功能实验研究
资助基金：上海市浦东新区临床高原学科项目(No.PWYgy2021-10)
论文发表日期：2025-10-10
在线出版日期：2025-10-24（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 2955-2962 )
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