m6A RNA甲基化酶METTL14调节YAP1对HK-2细胞缺血再灌注损伤的影响
李兰梅1
白伟伟1
陈娜1
孙绍婷1
王萌2
张明1
李亚芬1
1.沧州市人民医院(河北 沧州 061100)2.河北省沧州中西医结合医院
摘要：目的:探讨N6-甲基腺苷(m6A)RNA甲基化酶甲基转移酶14(METTL14)调节Yes关联蛋白1(YAP1)对HK-2细胞缺血再灌注(IR)损伤的影响.方法:体外培养HK-2细胞,并将细胞分为CK组、IR组、IR+si-NC组(转染si-NC)、IR+si-METTL14组(转染si-METTL14)、IR+si-METTL14+sh-NC组(转染si-METTL14+sh-NC)、IR+si-METTL14+sh-YAP1组(转染si-METTL14+sh-YAP1).采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)检测细胞活力;酶联免疫吸附法(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)含量;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中METTL14和Yes关联蛋白1(YAP1)基因表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测Bax、Bcl-2、METTL14、YAP1蛋白表达.结果:与CK组比较,IR组HK-2细胞METTL14 mRNA表达、细胞LDH、IL-6、TNF-α、IL-1β水平、MDA含量、凋亡率、细胞中总mRNA的m6A修饰水平、Bax和METTL14蛋白表达水平升高,YAP1 mRNA表达、细胞增殖率、SOD和CAT活性、Bcl-2、Ki-67和YAP1蛋白表达水平降低(P<0.05).与IR+si-NC组比较,IR+si-METTL14组HK-2细胞METTL14 mRNA表达、细胞LDH、IL-6、TNF-α、IL-1β水平、MDA含量、凋亡率、细胞中总mRNA的m6A修饰水平、Bax和METTL14蛋白表达水平降低,YAP1 mRNA表达、细胞增殖率、SOD和CAT活性、Bcl-2、Ki-67和YAP1蛋白表达水平升高(P<0.05).与IR+si-METTL14+sh-NC组比较,IR+si-METTL14+sh-YAP1组HK-2细胞LDH、IL-6、TNF-α、IL-1β水平、MDA含量、凋亡率、细胞中总mRNA的m6A修饰水平、Bax表达水平升高,YAP1 mRNA表达、细胞增殖率、SOD和CAT活性、Bcl-2、Ki-67和YAP1蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:沉默METTL14表达可降低IR诱导的HK-2细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡,可能与提高YAP1表达和降低m6A修饰水平有关.
关键词：缺血再灌注HK-2细胞N6-甲基腺苷RNA甲基化酶甲基转移酶14Yes关联蛋白1实验研究
资助基金：河北省医学科学研究课题(No.20240478)
论文发表日期：2026-01-25
在线出版日期：2026-02-04（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 220-226 )
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