烤后烟叶基因组DNA提取条件优化
马林1
王广超1
罗昭标2
寇晓腾1
张文龙1
1.郑州轻工业学院烟草科学与工程学院,河南郑州,4500012.抚州市烟草公司资溪县分公司烟叶管理部,江西抚州,335300
摘要：为解决烤后烟叶基因组DNA提取稳定性差的问题,以烤后烟叶为材料,对CTAB法提取基因组DNA进一步改良优化:对CTAB沉淀缓冲液使用量、裂解时间、Tris平衡酚的处理次数和RNase处理时间4个影响因素进行单因素优化.实验结果表明:CTAB沉淀缓冲液使用DNA溶液体积的1.5倍、裂解时间40 min、Tris平衡酚抽提1次和RNase(10 mg/mL,1μL)处理10 min,能得到主带清晰的烤后烟叶基因组DNA.该方法提取得到的烤后烟叶基因组DNA OD260/ OD280为1.7 ～1.9,OD260/OD230＞ 2.0,35 ng左右基因组DNA即能得到清晰的RAPD和SCAR图谱,适用于以PCR为基础的分子生物学实验.
关键词：烤后烟叶基因组DNADNA提取PCR
分类号：S572(农作物)
论文发表日期：2013-03-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 59-63 )
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