基于烟草属特异性基因Ntsp151的环介导等温扩增检测
张轲1
杨金初2
赵旭2
童治军3
李萌4
徐永明2
张展2
孙九喆2
1.云南省烟草质量监督检测站,云南昆明 6501062.河南中烟工业有限责任公司技术中心,河南郑州 4500003.云南省烟草农业科学研究院/烟草行业烟草生物技术育种重点实验室/国家烟草基因工程研究中心,云南昆明 6500214.郑州轻工业大学食品与生物工程学院,河南郑州 450001
摘要：针对烟草属特异性基因Ntsp151序列保守区设计环介导等温扩增(LAMP)引物,基于SYBR Green I荧光染料对烟草材料进行可视化LAMP检测,对检测过程中的DNA提取方法和反应条件进行优化,并对LAMP反应体系的特异性和灵敏度进行评价.结果表明:使用Chelex-100提取的DNA可以直接进行LAMP扩增反应,显色效果较好;LAMP最适反应条件为扩增温度63℃、反应时间60 min、Mg2+浓度6 mmol/L;LAMP对17份非烟草材料和1份烟草材料基因组DNA的扩增显色结果与荧光值的检测结果一致,具有较好的特异性,其最低检测限为102 copies/μL.基于烟草属特异性基因Ntsp151的LAMP检测结果可视化强,且灵敏度高、特异性强,适用于现场抽检.
关键词：烟草属特异性基因Ntsp151环介导等温扩增可视化基因组
分类号：TS47(烟草工业)S338(作物遗传育种与良种繁育)
资助基金：云南省烟草专卖局(公司)重点项目(2020530000241034)河南中烟工业有限责任公司科技计划项目(ZW2015012)
论文发表日期：2023-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 110-117 )
英文信息