摘要：目的 探讨藜芦酸(VA)通过调控Nrf2/HO-1信号通路改善葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎氧化应激损伤及肠屏障功能障碍的分子机制.方法 将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(WT组)、DSS模型组及VA治疗组,10只/组.通过评估体质量变化、疾病活动指数(DAI)、结肠长度及组织病理学损伤.ELISA检测结肠组织中炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-10)水平,以及分析氧化应激标志物(SOD、GSH、MDA、COX-2)的表达.免疫荧光及Western blotting检测紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1)及Nrf2/HO-1通路相关蛋白的表达.体外构建H₂O₂(150 μmol/L)诱导的Caco-2细胞氧化应激模型,流式细胞术及DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)蓄积,并联合Nrf2抑制剂ML385验证VA的调控机制.结果 VA干预缓解DSS小鼠体质量下降(P<0.05)、结肠缩短(P<0.05)及DAI评分升高(P<0.05),以及修复肠黏膜隐窝结构、紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-1)表达(P<0.05)和增加杯状细胞数量(P<0.05).VA降低结肠组织中促炎因子TNF-α、IL-6水平(P<0.05),同时上调抗炎因子IL-10表达水平(P<0.05).VA逆转DSS诱导的SOD和GSH活性降低,以及MDA和COX-2水平升高(P<0.05).在H₂O₂诱导的Caco-2细胞模型中,流式细胞术和免疫荧光染色结果提示:VA降低ROS阳性细胞率和细胞内ROS蓄积;免疫荧光染色和Western blotting数据分析显示:VA增加了Claudin-1和ZO-1蛋白的表达.机制上,VA促进Nrf2及下游HO-1蛋白表达(P<0.05),以及Nrf2抑制剂ML385部分拮抗了VA对H₂O₂诱导的ROS阳性细胞比例的下降.结论 VA通过激活Nrf2/HO-1通路增强抗氧化防御、抑制炎症反应并修复肠屏障功能,为IBD治疗提供新策略.

摘要：目的 探讨姜黄素通过影响Ran结合蛋白3样(RANBP3L)的表达对2型糖尿病(T2DM)引起的骨质疏松的治疗作用.方法 取MC3T3-E1细胞,成骨诱导培养后随机分为以下4组:对照组(Control),高糖处理组(HG),姜黄素组(Cur),高糖处理+姜黄素组(HG+Cur),药物预先干预24 h.CCK-8法筛选姜黄素最佳干预浓度;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红S(ARS)染色检测成骨分化和矿化相关标志物;采用RNA-seq测序分析姜黄素干预后高糖下培养MC3T3-E1成骨细胞转录特征.体内实验中,通过高脂饮食(HFD)和链脲霉素(STZ)注射建立T2DM小鼠模型,20只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常+溶剂组(Ctrl+Veh)、T2DM模型+溶剂组(T2DM+Veh)、T2DM模型+RANBP3L敲低+溶剂组(T2DM+KD+Veh)、T2DM模型+RANBP3L敲低+姜黄素组(T2DM+KD+Cur),5只/组.T2DM+KD+Cur组每日给予58 mg/kg的姜黄素灌胃处理,其余各组给予等量溶剂灌胃.ELISA检测小鼠血脂水平;HE染色观察骨微结构特征;茜素红S染色检测钙盐沉积情况;免疫组化染色检测ALP、RANBP3L表达;Q-PCR和Western blotting检测小鼠骨组织中RANBP3L、OCN、RANKL表达,及TNF-α/NF-κB通路相关蛋白表达情况.结果 姜黄素可促进高糖环境下MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化,下调RANBP3L蛋白的表达(P<0.01).体内研究表明,当RANBP3L基因敲减后,模型小鼠的骨微结构增强,成骨标志物水平提高,血糖浓度降低,血脂平衡改善,且TNF-α/NF-κB信号通路相关蛋白受抑制(P<0.05),联用姜黄素后可进一步降低小鼠骨组织中RANBP3L的表达并加强治疗效果(P<0.05).结论 姜黄素可通过降低RANBP3L的表达,促进成骨分化能力,缓解糖脂代谢紊乱,减轻二型糖尿病骨质疏松症,可能通过抑制TNF-α/NF-κB信号通路发挥作用.

摘要：目的 明确膜棕榈酰化蛋白6(MPP6)在肝细胞癌(HCC)中的表达,分析其表达与HCC患者临床病理特征和预后的关系,探讨其对HCC细胞生物学行为的影响.方法 选取2017年1月～2019年12月在我院行手术治疗的118例HCC患者肿瘤及癌旁组织标本,收集患者的临床病理资料,随访患者总生存期.采用免疫组化分析MPP6在肿瘤和癌旁组织中的表达水平;采用Cox回归分析MPP6表达水平与HCC患者临床病理特征和患者总生存期的相关性;采用平板克隆、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术检测MPP6对HCC细胞Hep3B生物学行为的影响.结果 与癌旁组织相比,MPP6在HCC组织中高表达(P<0.001);MPP6表达水平与患者肝硬化背景(P=0.028)和基线白蛋白水平(P=0.035)相关;生存分析提示,高表达MPP6患者预后较差(P<0.001);Cox回归分析显示,MPP6表达水平是患者总生存期的独立预测因素(P=0.012,HR:2.335,95%CI:1.502～3.629).体外敲减MPP6可致Hep3B细胞增殖、迁移及侵袭能力下降(P<0.05),并阻滞细胞周期于G0/G1期(P<0.001).结论 MPP6在HCC组织中高表达,并与HCC患者重要临床病理特征、不良预后相关;体外敲减MPP6可抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭能力并阻滞细胞周期于G0/G1期.

摘要：目的 开发一种经济、简便的人鼻粘膜类器官培养方法,用于建立EB病毒(EBV)体外感染模型.方法 从手术获得的鼻息肉组织,经清洗、剪切、消化、过滤后得到细胞团,在无基质胶的条件下经动态悬浮培养扩增为未分化的鼻粘膜类器官,再通过14 d的促分化处理以形成分化的鼻粘膜类器官,通过免疫荧光、免疫组化鉴定类器官主要细胞组成.加入EBV体外感染鼻粘膜类器官,通过RT-qPCR检测病毒特异性基因EBNA1、BALF5的表达,并通过EBNA1免疫荧光染色确认病毒感染.结果 动态悬浮培养法可在无基质胶的培养体系中,成功培养出由基底细胞、粘液细胞、纤毛细胞构成的鼻粘膜类器官.分化的鼻粘膜类器官高表达EBV相关受体EphA2、NRP1、NMHCⅡ-A.未分化和分化的鼻粘膜类器官均可被EBV感染,类器官中病毒复制随病毒暴露载量的增加而增加,分化类器官可能更有利于病毒复制(P<0.001).结论 无基质胶的动态悬浮培养法是一种经济、简便的鼻粘膜类器官建模方法,人鼻粘膜类器官能够作为EBV感染模型,为上皮EBV感染相关研究提供一个良好的平台.

摘要：目的 探讨天然植物提取物马鞭草苷(VE)对克罗恩病(CD)样结肠炎的改善作用及其机制.方法 建立2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎模型和脂多糖(LPS)刺激的结肠类器官损伤模型.将50只C57BL/6小鼠随机分为5组:WT组、TNBS组,VE低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg),10只/组.TNBS模型通过25 mg/L TNBS乙醇溶液灌肠建立,VE组每日腹腔注射相应剂量药物,连续治疗7 d.结肠类器官取自C57BL/6小鼠结肠隐窝,培养至第10天分为对照组、LPS组(100 μg/mL LPS处理24 h)和LPS+VE组(5、10、20 μmol/L VE共处理).通过疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分、脾指数及炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)评估VE的疗效;采用免疫荧光染色、Western blotting检测紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1)的表达;利用Western blotting检测PI3K-AKT通路蛋白的表达变化;结合PI3K-AKT通路激动剂740 Y-P干预实验验证通路调控机制.结果 VE缓解TNBS小鼠的结肠炎症状(降低DAI评分、结肠炎症评分及脾指数,缓解体质量下降和结肠缩短)(P<0.05),同时,VE干预可下调黏膜组织促炎因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)的表达(P<0.05),上调ZO-1和Claudin-1蛋白表达(P<0.05),减少细菌移位(P<0.05).机制上,VE可下调p-PI3K、p-AKT蛋白的表达(P<0.05),且其疗效可被PI3K-AKT激动剂(740 Y-P)逆转(P<0.05).结论 VE通过调控PI3K-AKT信号通路抑制肠道炎症,从而修复肠屏障功能,改善小鼠CD样结肠炎.

摘要：目的 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS分析研究党参-茯苓配伍(CRP)治疗痴呆症的作用机制.方法 采用于UPLC-Q-TOF-MS/MS分析单侧颈总动脉永久结扎(UCCA)模型大鼠的 CRP 的入血入脑成分,并对入血和入脑成分进行网络药理学分析.CRP灌胃UCCA 大鼠干预1个月后通过Morris水迷宫评价其学习记忆能力;苏木精-伊红染色观察海马和皮质的病理形态学变化;NeuN染色分析海马和皮层神经元数量变化;采用代谢组学分析 CRP 治疗UCCA大鼠前后脑内代谢物变化差异;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑内谷氨酸和γ-氨基丁酸(GABA)的含量;免疫组化法考察雌激素受体α(ERα)的蛋白表达;Western blotting分析p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt的蛋白表达.结果 在UCCA大鼠的脑组织和血液中分别鉴定出125种和126种成分,其中,脑组织中发现了89种党参成分和 36 种茯苓成分,血液中发现了85种党参成分和41种茯苓成分.网络药理学分析表明,CRP治疗痴呆主要与调节进入脑组织的成分所影响的PI3K/Akt等信号通路有关.与假手术组比较,模型大鼠的第5天的逃避潜伏期明显延长(P<0.01),平台象限活动时间、海马和皮质的神经元明显损伤且NeuN平均光密度明显下降(P<0.05);脑内谷氨酸和GABA/谷氨酸含量明显升高(P<0.05),ERα、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达下调(P<0.05).与模型组比较,CRP干预大鼠的第5天的逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数、平台象限活动时间均明显增加(P<0.05),海马和皮质的神经元损伤好转且NeuN平均光密度明显升高(P<0.05);代谢组学分析表明CRP治疗作用主要富集于雌激素信号通路和 GABA 能突触等信号通路.CRP组大鼠脑内的谷氨酸和GABA/谷氨酸含量明显降低(P<0.05),ERα、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达上调(P<0.05).结论 CRP 能够改善UCCA痴呆大鼠的学习和记忆缺陷,这与其对脑内ERα/PI3K/Akt信号通路的调节有关.

摘要：目的 通过模拟研究探讨不同缺失值处理方法对AC1系数(第一阶一致性系数)估计的影响,为实际应用提供参考.方法 使用Monte Carlo模拟生成不同缺失机制下的无序评价数据,模拟参数包括评价者数量、类别数量、样本量、疾病流行率、偶然评价率和缺失比例.比较删除零评价受试者法、删除非完整评价受试者法、评价者众数填补法和受试者众数填补法4种缺失值处理方法,以偏差(bias)和均方误差(MSE)作为评价指标.结果 在疾病流行率均衡或缺失机制为完全随机缺失(MCAR)/随机缺失(MAR)时,删除零评价受试者法表现最佳,在缺失比例低于30%时偏差和MSE近乎为0.而当流行率非均衡且存在非随机缺失(MNAR)时,受试者众数填补法更具优势,其偏差控制在±0.10以内,MSE保持在0.09以下,尤其在样本量充足且缺失比例不超过30%时MSE几乎为0.评价者众数填补法在所有场景中表现最差.删除非完整评价受试者法仅在2评价者2分类、低缺失比例且为MCAR/MAR时误差较小,其他场景下稳定性不足.结论 不存在一种普遍最优的缺失值处理方法.在流行率均衡或可假设数据缺失机制为MCAR和MAR时,推荐删除零评价受试者法;在流行率非均衡且怀疑存在MNAR时,推荐受试者众数填补法.此外,建议研究者同时汇报多种方法下的AC1系数估计值以评估结果敏感性.

摘要：目的 探索槲皮素调控胃癌细胞增殖、迁移与凋亡的分子机制.方法 生物信息学分析Hippo通路蛋白YAP在胃癌和胃癌旁正常组织的表达差异和生存率.Western blotting检测各样本中YAP和磷酸化YAP(p-YAP)的表达水平.槲皮素处理胃癌细胞,CCK8检测细胞活力;敲低YAP基因和槲皮素处理胃癌细胞进行分析比较,EdU、集落形成实验检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting 和RT-qPCR检测相关基因和蛋白表达水平;免疫荧光检测蛋白定位.过表达YAP基因进行回复实验验证.结果 YAP在胃癌组织的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05);YAP的表达与胃癌患者存活率呈负相关(P<0.01);槲皮素可明显降低胃癌细胞的存活率(P<0.01),促进MST1和LATS1蛋白表达,激活Hippo信号通路,导致YAP的磷酸化失活,核转位减少(P<0.05);敲降YAP表达和槲皮素处理均能够明显抑制胃癌细胞的增殖、迁移能力,促进细胞的凋亡(P<0.05);过表达YAP能够明显降低槲皮素对胃癌细胞增殖、迁移能力的抑制作用和凋亡的促进作用(P<0.05).结论 槲皮素可促进YAP磷酸化降解抑制胃癌细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡.

摘要：目的 探讨植物乳杆菌(L.plantarum)缓解铅暴露引起的学习记忆障碍的作用及机制.方法 将24只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、铅组和L.plantarum+铅组(8只/组),对照组的小鼠只喝无菌蒸馏水.铅组、L.plantarum+铅组小鼠饮用溶于无菌蒸馏水的氯化铅溶液,对照组、铅组小鼠每天灌胃0.1 mL磷酸盐缓冲盐水1次,L.plantarum+铅组小鼠每天灌胃含有L.plantarum的磷酸盐缓冲盐水0.1 mL1次,其中铅的暴露剂量为100 mg/L,通过灌胃进行L.plantarum(109 CFU)干预.干预10周后,采用Morris水迷宫实验评价小鼠的学习记忆能力,电感耦合等离子体-质谱法(ICP-MS)检测小鼠血铅含量,液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测小鼠血清胆汁酸含量,HE染色检测海马组织病理学改变,免疫组化法观察海马区小胶质细胞形态学改变及活化状态,ELISA实验检测小鼠血清炎性细胞因子TNF-α和IL-1β含量,Western blotting实验检测NLRP3和TGR5蛋白表达水平.结果 与单独铅暴露组相比,L.plantarum干预增加了小鼠在Morris水迷宫实验中目标象限中的探索时间(P<0.05)、游泳距离(P<0.05)和平台穿越次数(P<0.05),减少了寻找水下隐藏平台的潜伏期(P<0.05);并且L.plantarum干预部分逆转铅暴露引起的血清中脱氧胆酸(P<0.05)、3-羟基脱氧胆酸和3-羟基熊去氧胆酸(P<0.05)、3-硫代脱氧胆酸(P<0.01)和3-硫代α-甲基胆酸(P<0.05)等胆汁酸含量的下降;同时L.plantarum干预恢复了铅暴露诱导的海马体病理改变,降低铅暴露所致的小鼠神经炎症因子IL-1β、TNF-α和海马体NLRP3蛋白水平.结论 L.plantarum可缓解铅暴露引起的学习记忆障碍,其机制可能与胆汁酸代谢以及抑制NLRP3蛋白有关.

摘要：目的 探讨清解扶正颗粒(QFG)缓解5-氟尿嘧啶(5-FU)导致骨骼肌萎缩的作用及其机制.方法 采用CT26细胞制备小鼠皮下移植瘤模型,10只/组,待瘤体长至100 mm3,根据瘤体大小将小鼠分为对照(CT26)组、模型(5-FU,50 mg/kg)组、干预(5-FU,50 mg/kg+QFG,1 g/kg)组,同时设置正常组.模型组和干预组小鼠给予5-FU腹腔注射,1次/3 d;干预组同时灌胃 QFG,1次/d;正常组和对照组小鼠腹腔注射和灌胃等体积的生理盐水,连续干预21 d.在干预前1 d以及干预第20天进行抓力试验和悬挂试验;在第21天取材后称量瘤体质量和腓肠肌的质量;苏木素-伊红(HE)染色、透射电镜和原位末端转移酶标记(TUNEL)法观察腓肠肌组织形态改变;比色法检测腓肠肌三磷酸腺苷酶(ATP)含量;免疫组织化学(IHC)方法检测腓肠肌AMPK、PGC-1α、细胞色素(Cyto)C、凋亡诱导因子(AIF)、凋亡蛋白酶激活因子(Apaf)-1、第二个线粒体衍生半胱天冬氨酸蛋白酶激活剂(Smac)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved caspase-3)和cleaved caspase-9蛋白表达.结果 与正常组比较,对照组腓肠肌质量、抓力和悬挂评分变小(P<0.05),腓肠肌纤维结构和超微结构损伤,线粒体减少,ATP含量降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),腓肠肌AMPK、PGC-1α、Bcl-2表达降低(均P<0.05),Bax、Cyto C、AIF、Apaf-1、Smac、cleaved caspase-3 和cleaved caspase-9表达升高(均P<0.05).与对照组比较,模型组腓肠肌质量、抓力和悬挂评分更小(P<0.05),腓肠肌纤维结构和超微结构损伤严重,ATP含量降低(P<0.05),细胞凋亡进一步增加(P<0.05),腓肠肌AMPK、PGC-1α、Bcl-2表达降低(均P<0.05),Bax、Cyto C、AIF、Apaf-1、Smac、cleaved caspase-3 和cleaved caspase-9 表达升高(均P<0.05).与模型组比较,干预组腓肠肌质量、抓力和悬挂评分增加(均P<0.015),腓肠肌纤维结构和超微结构损伤减轻,细胞凋亡减少(P<0.05),腓肠肌AMPK、PGC-1α、Bcl-2表达升高(均P<0.05),Bax、Cyto C、AIF、Apaf-1、Smac、cleaved caspase-3 和cleaved caspase-9表达降低(均P<0.05).结论 QFG缓解5-FU所致荷瘤小鼠的骨骼肌疲劳,其机制与AMPK/PGC-1α通路活化,抑制腓肠肌线粒体依赖性细胞凋亡有关.

摘要：目的 提升12导联心电图(ECG)自动诊断的准确性和可信度.方法 提出了一种基于深度特征融合的12导联ECG自动诊断模型(MRHL-ECGNet).该模型包含多尺度特征提取前端、ResNet-34、全局特征混合模块及时间序列分析模块,首次将Hyena Hierarchy卷积算子应用于12导联心电图自动诊断任务中,以高效捕捉ECG中的长程依赖关系,并显著降低模型计算复杂度.同时采用基于积分梯度(IG)的可解释性分析技术,实现MRHL-ECGNet决策依据可视化.使用CPSC2018数据集对MRHL-ECGNet进行训练和测试,并采用多项定量评价指标与评估实验对MRHL-ECGNet进行全面评估.结果 在测试集上对9种类别ECG的分类任务中,MRHL-ECGNet的准确率、AUC值、F1分数、精确率和召回率分别达到0.972、0.983、0.864、0.873和0.857,均优于其他对比模型,且在GPU上对单样本输出诊断结果所需的时间为0.007s,在CPU上也仅需0.156s,内存占用为67.196MB.结论 本研究提出的MRHL-ECGNet不仅具有卓越的分类性能,还具备轻量化及可解释性的特点,在临床ECG辅助诊断中具有较高的应用价值.

摘要：目的 基于网络药理学探讨降脂祛斑方治疗2型糖尿病合并高脂血症的分子机制,并通过动物实验和临床对照试验验证其疗效与安全性.方法 基于TCMSP和GeneCards数据库筛选降脂祛斑方活性成分和疾病靶点,构建网络图并进行PPI分析、GO功能和KEGG通路富集分析.动物实验用ApoE-/-小鼠高脂饲料造模24周,设空白组、模型组、中药低/高剂量组和辛伐他汀组(n=6),第9～24周给药,检测体质量、血糖、血脂、肝脏病理及炎症因子表达.临床研究纳入72例2型糖尿病合并高脂血症患者,随机分为观察组和对照组,36例/组,均给予二甲双胍联合恩格列净基础治疗,观察组加用降脂祛斑方,对照组加用辛伐他汀,治疗12周后观察相关指标变化.结果 网络药理学筛得65个潜在靶点,核心成分包括槲皮素、山奈酚、木犀草素等,关键靶点为IL-6、IL-1β、TNF-α等.富集分析显示主要涉及炎症反应、糖尿病并发症等通路.动物实验显示,降脂祛斑方呈剂量依赖性改善体质量、血糖及血脂(P<0.05),高剂量组肝脂肪变性改善优于辛伐他汀组,炎症因子降低(P<0.05).临床研究中,观察组29例、对照组31例完成试验.观察组治疗后体质量、空腹血糖、甘油三酯、糖化血红蛋白及肝酶水平改善(P<0.05),空腹血糖水平低于对照组(P<0.05),两组总有效率相近(P>0.05).结论 降脂祛斑方通过多成分协同作用,可能主要通过调控炎症-代谢网络发挥治疗2型糖尿病合并高脂血症的效果.

摘要：目的 探讨微RNA 221-3p(miR-221-3p)在有氧运动改善高脂饮食诱导的脂肪组织巨噬细胞极化及胰岛素抵抗(IR)中的作用及潜在生理机制.方法 60只5周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为普通膳食组(20 只)和高脂膳食组(40 只).在高脂膳食干预12周后,筛选出IR小鼠.经过造模和筛选,最终选取16只普通小鼠和16只IR小鼠进入后续实验.将小鼠随机分为4组(n=8):正常安静组(CS组),正常运动组(CE组),高脂安静组(HS组)和高脂运动组(HE组).运动组进行为期8周的跑台运动(坡度0°,跑速15～20 m/min,1 h/d,5 d/周).同时对小鼠单核巨噬细胞进行miR-221-3p转染,进一步验证miR-221-3p对巨噬细胞极化的作用.实验干预结束后,检测小鼠体质量、体成分;ELISA和生化试剂盒检测小鼠空腹血糖、胰岛素及血脂4项水平;采用荧光定量PCR(qPCR)检测miR-221-3p、Socs1、Tnf-α和Arg-1相对含量;双荧光素酶报告基因实验(Luciferase)验证miR-221-3p与细胞因子信号抑制蛋白1(SOCS1)的靶向关系Western blotting检测脂肪组织SOCS1、Janus激酶1(JAK1)、磷酸化信号转导子和转录激活子1和3(p-STAT1、p-STAT3)的蛋白表达水平.结果 有氧运动显著降低小鼠体质量、脂肪质量和体脂率,空腹血糖、胰岛素水平胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平显著降低(P<0.01),瘦体质量显著升高(P<0.01).qPCR结果显示,与CS组相比,HS组小鼠血浆和脂肪组织miR-221-3p的相对表达量均显著升高(P<0.01);有氧运动显著降低小鼠血浆和脂肪组织miR-221-3p的相对表达量(P<0.01).Western blotting结果显示,有氧运动显著降低了iNOS、JAK1和p-STAT1/STAT1的蛋白表达(P<0.01),Arg-1、SOCS1和p-STAT3/STAT3的蛋白表达显著提高(P<0.05,P<0.05,P<0.01).体外实验结果显示过表达miR-221-3p可以显著降低Socs1、Arg-1的基因表达(P<0.01),miR-221-3p抑制剂显著促进了M2型巨噬细胞极化状态.结论 有氧运动可能通过抑制miR-221-3p的表达,靶向激活SOCS1及下游JAK/STAT信号通路,抑制脂肪组织巨噬细胞M1极化,促进巨噬细胞M2极化,减轻脂肪组织炎症反应,从而提高组织胰岛素敏感性.

摘要：目的 探讨茯苓新酸A(PAA)调控肠上皮细胞自噬对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用和机制.方法 18只C57BL/6小鼠随机分为对照组(WT组)、DSS模型组(DSS组)及PAA干预组(10 mg/kg),6只/组,评估小鼠体质量、结肠长度、疾病活动指数(DAI)及组织病理学评分等变化;构建DSS诱导的Caco-2细胞损伤模型,检测肠屏障蛋白(ZO-1、Claudin-1)、凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax/C-caspase3)及自噬标志物(LC3-II/I、P62)表达.通过分子对接和Western blotting分析PAA的作用机制.结果 PAA显著改善DSS小鼠的体质量下降(P<0.05)、结肠缩短(P<0.05)及DAI评分升高(P<0.05),并降低结肠组织中促炎因子IL-1β和TNF-α水平(P<0.05).此外,HE染色显示PAA缓解结肠隐窝损伤,降低炎症细胞浸润和炎症评分(P<0.05),AB-PAS染色显示PAA干预小鼠肠黏膜杯状细胞数量显著高于DSS组.PAA抑制了DSS诱导的紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-1)表达降低(P<0.05)和肠上皮细胞凋亡(降低Bax、C-caspase3,上调Bcl-2,P<0.05).进一步分析发现,PAA可显著激活肠上皮细胞自噬水平(LC3-II/I比值升高,P62水平降低,P<0.05).机制研究表明,PAA可通过靶向调控AMPK/mTOR信号,激活自噬并抑制肠上皮细胞凋亡.结论 PAA通过AMPK/mTOR介导的自噬激活与肠上皮细胞凋亡途径,保护肠屏障功能和改善DSS诱导的小鼠结肠炎.

摘要：目的 建立基于扩散循环一致性生成对抗网络的骨盆活跃骨髓(ABM)分割方法,突破传统解剖图谱方法个体化精度不足的技术瓶颈.方法 收集253例患者骨盆PET-CT数据,构建三阶段级联跨模态学习框架实现从CT到个体化ABM精准识别.首先通过循环一致性生成对抗网络建立CT-PET双向映射,采用9个残差模块学习跨模态特征关系.设计条件扩散模块基于1000步马尔可夫链实现渐进去噪,融合双向交叉注意力机制动态整合解剖与功能信息.最后构建多尺度渐进式特征金字塔分割网络,在4个尺度层级累积多模态特征实现ABM区域分割.采用峰值信噪比(PSNR)、结构相似性指数(SSIM)、归一化均方误差(NMSE)评估图像合成质量,Dice相似系数(DSC)、平均对称表面距离(ASSD)评估分割性能.结果 本方法均优于现有方法,PSNR达到26.42±0.63 dB,SSIM达到0.894±0.011,NMSE降至0.0235±0.0026.在ABM分割任务中,平均Dice系数达到0.777±0.023,ASSD降至3.52±0.41 mm.结论 与传统方法相比,该方法显著提高了个体化分割精度,适用于直肠癌个体化骨髓保护放疗的临床应用.

摘要：目的 分析颈椎病(CS)终板软骨的转录组学特征及针刀对FGF18/Akt轴关键分子表达的影响.方法 基于GEO数据库结合生物信息学方法分析CS终板软骨的差异基因、关键信号通路等转录组学特征,并开展针刀干预CS兔模型的动物实验进行验证.24只SPF级新西兰兔随机分为正常组、CS组、针刀组,8只/组.除正常组兔外,余兔采用低头位法构建CS模型,采用X线验证CS模型是否成功构建.造模成功1周后,正常组和CS组兔正常饲养,针刀组兔进行针刀干预,1次/周,共干预3周.HE染色观察颈椎间盘病理结构改变,Tunel法检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测椎间盘FGF18、FGFR3、Akt的mRNA表达,免疫组化法检测椎间盘髓核、终板软骨和纤维环的FGF18、p-Akt、Akt蛋白定位和表达情况.结果 与正常终板软骨相比,CS终板软骨存在大量差异表达基因,并显著富集于PI3K-Akt、钙离子、Rap1等信号通路;X线结果表明造模前后颈椎生理曲度、关节退行性改变等符合CS临床表现;HE染色结果发现CS颈椎间盘纹理杂乱,椎间盘纤维环变薄,髓核变小消失,针刀可缓解CS以上病理改变;qPCR结果发现与正常组兔相比,CS颈椎间盘FGF18、FGFR3、Akt表达差异无统计学意义(P>0.05),与CS组相比,针刀组FGF18、FGFR3、Akt表达差异亦无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,针刀可显著提高CS颈椎终板软骨FGF18及p-Akt的蛋白表达(P<0.05),降低CS颈椎终板软骨周围Akt与p-Akt的比值(P<0.05);Tunel显示CS组终板软骨凋亡细胞增多(P<0.05),针刀可减轻细胞凋亡(P<0.05).结论 CS颈椎终板软骨存在大量差异表达基因,针刀可能通过有效激活FGF18/Akt轴,减轻终板软骨细胞凋亡,从而延缓椎间盘退行性改变治疗CS.

摘要：目的 明确核糖核酸外切酶3(ERI3)在肝癌组织中的表达情况,并分析其对患者远期预后的评估价值以及对肿瘤细胞转移的影响和可能的机制.方法 通过TCGA-LIHC数据集(377例肝癌与50例癌旁组织),采用DESeq2进行ERI3差异表达分析,结合HPA数据库免疫组化验证.通过STRING与GeneMANIA构建蛋白互作网络;利用Cox回归、KM生存分析评估预后价值;ROC曲线分析诊断效能;ssGSEA算法进行免疫浸润相关性研究;多因素Cox回归构建列线图预后模型.实验验证采用人肝癌细胞系SMMC-7721,通过敲低基因ERI3后,使用克隆形成、划痕及Transwell实验检测增殖、迁移与侵袭能力.结果 ERI3在肝癌组织中显著高表达(P<0.001),且表达水平随TNM分期升高而递增(T1-T4:P<0.001).高表达ERI3患者总生存期(OS,HR=2.86,95%CI:1.68-4.88,P<0.001)、疾病特异性生存期(DSS,HR=2.27,P=0.013)及无进展生存期(PFI,HR=1.83,P=0.012)均显著缩短.诊断效能分析显示ERI3的AUC达0.955(95%CI:0.931-0.978).免疫浸润研究发现ERI3与Th2细胞呈正相关(r=0.340,P<0.001),与Th17细胞呈负相关(r=-0.284,P<0.001).多因素Cox回归证实ERI3是独立预后因子(HR=1.987,P=0.003),据此构建的列线图预测效能良好(C-index=0.668).体外实验表明,敲低ERI3可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P<0.05).结论 ERI3高表达可显著促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,且与患者预后不良有关.

摘要：目的 探讨叶酸(FA)修饰的髌下脂肪垫间充质干细胞(IPFP-MSCs)来源外泌体(Exos)通过调控巨噬细胞M1/M2极化改善膝骨关节炎(KOA)炎症微环境的作用.方法 提取培养IPFP-MSCs,加入FA进行处理,利用超速离心法分离Exos.将RAW264.7细胞分为对照组(未处理)、脂多糖(LPS)组(加入LPS)、LPS+Exos组(加入LPS及Exos)和LPS+FA-Exos组(加入LPS及FA修饰的Exos),分别处理12 h.采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot鉴定外泌体,使用共聚焦显微镜观察其摄取情况.通过q RT-PCR、ELISA、流式细胞术和免疫荧光检测各组促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS)与抗炎因子(ARG1、MRC1、CD206)表达水平.结果 透射电镜显示IPFP-Exos呈典型杯状,CD9与CD81蛋白表达阳性;共聚焦结果证实其可被巨噬细胞摄取.qRT-PCR与ELISA结果表明,LPS+FA-Exos组促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、NOS2表达较LPS组显著下降(P<0.0001),抗炎因子ARG1、MRC1表达升高(P<0.0001).流式检测显示,FA-Exos组CD86阳性比例下降,CD206及其比值升高(P<0.0001).免疫荧光显示FA-Exos组iNOS表达减少(P=0.0478),CD206表达增强(P=0.0003).结论 FA-Exos可有效调控巨噬细胞由M1型向M2型极化,免疫调节作用优于未修饰Exos,这种双重调控机制可有效缓解关节腔促炎微环境,为KOA的靶向治疗提供了新型外泌体修饰策略.

摘要：目的 研究茯苓多糖(PCP)对环磷酰胺(CTX)诱导的肠道粘膜损伤的修复作用,探讨其对肠道微生物群和代谢产物的影响,以及对肠粘膜损伤小鼠的潜在保护机制.方法 建立CTX诱导的小鼠肠道黏膜损伤模型,观察PCP对肠道屏障和免疫功能的保护作用.小鼠随机分为6组:正常对照组(NC)、CTX模型组(MC)、CTX+谷氨酰胺阳性药物组(PC)、CTX+PCP低剂量组(LD)、CTX+PCP中剂量组(MD)、CTX+PCP高剂量组(HD).除NC组外,其余各组小鼠连续3 d腹腔注射CTX(80 mg/kg),NC组注射生理盐水.PC组给予谷氨酰胺(300 mg/kg),LD、MD、HD组分别给予PCP(75、150、300 mg/kg),连续灌胃7 d.检测各组小鼠紧密连接蛋白(occludin、ZO-1)表达水平、血清内毒素、D-乳酸盐、二胺氧化酶(DAO)水平、肠道通透性、结肠损伤情况以及细胞因子(IL-4、IL-22、IL-17A、IFN-γ等)水平变化.16S rRNA测序分析肠道微生物群组成变化,气相色谱-质谱法检测短链脂肪酸(SCFAs,如乙酸、丙酸)水平,Western blotting检测GPR41表达.粪菌移植(FMT)实验验证肠道微生物在PCP修复肠道损伤中的作用.结果 与模型组相比,PCP处理组小鼠结肠组织中紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达显著升高(P<0.001),血清内毒素、D-乳酸盐、DAO水平及肠道通透性均显著降低(P<0.05),结肠组织中IL-4、IL-22、IL-17A和IFN-γ的mRNA表达水平显著升高(P<0.001).PCP处理组小鼠肠道中Muribaculaceae相对丰度增加(P<0.01),Lactobacillus和Bacteroides相对丰度减少(P<0.05),结肠内容物中乙酸和丙酸含量升高(P<0.05),GPR41蛋白表达水平显著升高(P<0.001).FMT实验证实了肠道微生物在PCP修复肠粘膜损伤中的关键作用.结论 PCP能够保护CTX引起的肠粘膜损伤,其机制可能通过调节肠道微生物群和短链脂肪酸的代谢,从而增强肠道的防御能力.

摘要：目的 探讨不同欠采样方法在解决小样本数据类别不平衡问题中的应用,以提高机器学习模型术前预测子宫肌瘤高强度聚焦超声(HIFU)消融效果的准确性.方法 收集在佛山市妇幼保健院就诊的140例HIFU治疗子宫肌瘤患者临床及影像学数据,其中高消融率组104例,低消融率组36例,提取患者MRI-T2WI影像组学特征,构建HIFU治疗机器学习预测模型.应用7种欠采样方法,即随机欠采样(RUS)、重复编辑最近邻(RENN)、全K最近邻(AllKNN)、近邻缺失-3(NM)、凝聚最近邻(CNN)、邻域清理规则(NCR)和实例硬度阈值(IHT),使用4种机器学习模型,即K最近邻(KNN)、随机森林(RF)、支持向量机(SVM)和多层感知机(MLP)共计构建28种预测模型处理类别不平衡数据,并通过5折交叉验证方法、以受试者工作特征曲线下面积(AUC)、准确率、召回率和特异性等评估各模型性能.结果 欠采样方法与机器学习模型交叉组合的结果为:4种最佳组合AUC即CNN-RF为0.772(95%置信区间:0.566～0.942)、NM-SVM为0.797(95%置信区间:0.600～0.950)以及CNN-KNN和NM-MLP均为0.822(95%置信区间分别为0.635～0.964、0.632～0.960).各机器学习模型的AUC在欠采样后均显著增高,其中以MLP模型改善最明显;各模型的召回率也显著增加,即CNN-RF召回率增加0.389、NM-SVM为0.836、CNN-KNN为0.532、NM-MLP为0.372.结论 欠采样方法可有效解决小样本类别不平衡问题,为构建子宫肌瘤HIFU消融效果的机器学习预测模型提供新思路.