摘要：[目的]在西藏墨脱地区,枇杷叶斑病是枇杷生产上的主要病害,因此有必要明确该地区枇杷叶斑病病原菌的种类及其拮抗细菌对病害的防治效果.[方法]2023-2024年从该地区的7个枇杷种植区采集病叶,利用病组织分离法分离菌株,通过致病力测定(柯赫氏法则)、形态学特征观察和多位点序列分析(rDNA-ITS、mtSSU、TUB和TEF-1α基因)对病原菌进行鉴定,采用平板对峙法检测拮抗细菌的抑菌活性,利用喷雾法和浸液法分别测定拮抗细菌对枇杷叶斑病及贮存期果实病害的防治效果.[结果]从枇杷病样中分离获得的22株菌株,经鉴定为新拟盘多毛孢菌Neopesta-lotiopsis clavispora、N.eucalypticola、N.formicarum 和 N.cubana,菌株出现频率分别为 81.82％、4.55％、4.55％和9.10％.平板对峙结果表明5株供试拮抗细菌对病菌N.clavispora均具有较好的拮抗活性,抑菌带宽度介于7.33～14.33 mm.其中,拮抗细菌S8、T122F和NJ-1等的20倍稀释发酵液处理对枇杷新拟盘多毛孢叶斑病的防效分别为81.25％、66.52％和63.84％,对枇杷果斑病防效分别为48.24％、39.68％和49.31％.[结论]新拟盘多毛孢菌N.clavispora、N.eucalypticola、N.formicarum和N.cubana引起的枇杷叶斑病在西藏地区为首次报道,其中N.clavispora为优势病原菌.拮抗细菌S8、T122F和NJ-1对枇杷新拟盘多毛孢叶斑病表现出较大的生防潜力,对贮存期枇杷果实具有一定的保鲜效果,可为当地枇杷叶斑病的绿色防控提供重要参考.

摘要：吉农软枣1号猕猴桃是以2011年在吉林省白山市长白县宝泉山镇野生资源调查时发现的优良单株为材料,经系统选育而成的早熟软枣猕猴桃新品种.果实长圆柱形,果皮绿色,具蜡质,果肉绿色,果心绿白色,汁液丰富,风味酸甜适宜,平均单果质量17.4 g,最大单果质量22.63 g,果形指数1.74.果实可溶性固形物含量(w,后同)20.2％,可溶性糖含量8.46％,可滴定酸含量1.46％,出汁率65％,维生素C含量1.43mg·g-1,品质上等.果实发育期80～85 d,在长春地区,该品种于4月下旬萌芽,6月上旬开花,8月下旬果实成熟.每花序着生1～3朵花,萌芽率77.3％,成枝力66.7％.抗逆性强,经多年、多点连续观察的结果表明,无冻害发生,且对茎基腐病表现出较强抗性.6年生果园平均产量18 340.8 kg hm-2.果实货架期5～10 d,冷藏期约45 d.适宜在年无霜期125 d以上、年活动积温2700 ℃以上、冬季极端最低气温不低于-38 ℃的地区及相似产区引种试栽;定植后第3年开花结果,丰产性良好.

摘要：[目的]明确鲁丽和大卫嘎拉苹果在山西南部盆地的最佳采收期.[方法]本研究对不同成熟度鲁丽和大卫嘎拉果实进行淀粉染色,构建淀粉染色图谱,并分析果实品质与其相关性,确定以淀粉染色为主要依据的采收标准.[结果]鲁丽苹果花后116～123 d,淀粉指数为5.40～6.53,横纵径、质量和体积趋于稳定,果皮由局部着色转变为完全着色,果实硬度为9.42～10.49 kg·cm-2,可溶性固形物含量(w,后同)为13.20％～14.33％,鲜食与贮藏60 d后品质表现皆好(果实硬度约为7.60 kg·cm-2).大卫嘎拉苹果花后119d,淀粉指数为5.93,横纵径、质量和体积趋于稳定,果皮完全着色,果实硬度为11.02kg·cm-2,可溶性固形物含量为13.33％,鲜食与贮藏60 d后品质表现皆好(硬度为7.13 kg·cm-2,可溶性固形物含量为15.87％).相关性分析表明,淀粉指数与单果质量、可溶性固形物含量呈极显著正相关(P＜0.01),与果实硬度、可滴定酸含量呈极显著负相关(P＜0.01).[结论]鲁丽和大卫嘎拉苹果适宜采收期的淀粉染色标准为:淀粉染色表现为萼片、花瓣维管束呈10个染色较深的离散团状,淀粉指数鲁丽为5.40～6.53(花后116～123d)、大卫嘎拉为5.93(花后119 d).

摘要：[目的]系统比较泰国红宝石柚与越南青柚、红玉香柚、三红蜜柚、星露比葡萄柚、暹罗红柚的果肉代谢成分并筛选差异特征代谢物,为其功能性成分开发及综合利用提供一定的理论基础.[方法]采用液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)联用技术对6个柚类品种的果肉代谢成分进行非靶向代谢组学分析,通过主成分分析(PCA)揭示品种间的整体差异,利用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)将泰国红宝石柚与其他品种进行比较,筛选出品种间的差异代谢物,并对差异代谢物进行KEGG通路富集分析.[结果]通过UPLC-MS/MS分析共鉴定到1019种代谢物,其中55种代谢物在6个品种中表现出显著差异,主要包括12种苯丙酮和多酮类,12种脂质和类脂质分子,10种有机酸及其衍生物,8种有机杂环化合物,5种苯类化合物等.其中,苯丙酮和多酮类化合物、脂质和类脂质分子占比最高.KEGG通路富集分析结果显示,苯丙烷类、硫代葡萄糖苷、氨基酰-tRNA、氰氨酸生物合成是最显著的差异代谢路径.在泰国红宝石柚中,苯丙烷类生物合成途径中芥子酸、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖含量上调;硫代葡萄糖苷、氨基酰-tRNA、氰氨酸生物合成途径中L-缬氨酸、L-酪氨酸和DL-异亮氨酸含量同时上调;其他次生代谢物合成途径中吲哚-3-乙醛、1-戊二酰基-2-羟基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、滨蒿内酯、花椒醇含量上调,东莨菪内酯含量下调.[结论]芥子酸、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖、L-缬氨酸和L-酪氨酸等10种代谢物可能是参与泰国红宝石柚果实品质形成的关键代谢物.

摘要：[目的]为明确猕猴桃细菌性溃疡病的抗性代谢机制,基于代谢组学技术对病菌侵染不同时间的山梨与中华猕猴桃杂交种质(抗病种质E2545和感病种质E674)进行代谢物定性定量分析,旨在筛选与猕猴桃抗细菌性溃疡病相关的差异代谢物,并明确其参与的植物抗病代谢途径,为猕猴桃抗溃疡病育种及抗性机制解析提供理论支撑.[方法]采用离体枝条接种法对抗感种质进行病原菌接种,并于接种前及接种后3 d、7d、14 d四个时期,对接种点上下1 cm处的枝条木质化组织取样.进一步采用高效液相色谱-串联质谱法(LCMS/MS)及非靶向代谢组学检测抗感种质的差异代谢物.[结果]抗感猕猴桃种质间差异代谢物种类主要为苯和取代衍生物、香豆素及其衍生物、异戊烯醇脂类、羧酸及其衍生物等.87种差异代谢物在抗病材料中的含量始终高于感病材料,推测这些代谢物可能在猕猴桃抵御溃疡病菌侵染机制中发挥重要作用.进一步筛选出阿司匹林(aspirin)、甘草酸(liquoric acid)、pestalactam B、缬草素(valtratum)4种可能具有重要应用潜力的防御相关代谢物.苯丙烷类生物合成通路及苯丙烷代谢通路可能是猕猴桃响应溃疡病菌侵染的关键代谢途径.[结论]本研究对溃疡病菌侵染不同时间的山梨与中华猕猴桃杂交群体的抗感种质进行了代谢物定性定量分析,从代谢角度阐明了猕猴桃抗感种质响应溃疡病菌侵染的分子机制,为快速筛选与挖掘抗病种质奠定了理论基础,同时为研发新型生防药剂提供了理论依据.

摘要：[目的]探究不同浓度放线菌发酵液肥对骏枣生长和结果的影响.[方法]以4年生骏枣为试材,分别于展叶期、幼果期和白熟期叶面喷施3次不同浓度放线菌发酵液肥(原液稀释50倍、100倍、200倍),测定枣树生长生理及产量品质等相关指标.[结果]骏枣新发枣头枝基径在5月和7月YF100处理下较对照(喷清水)显著提高;二次枝基径在5月和8月YF100处理和7月YF50处理下均较对照有所增加;叶片厚度在5、7和8月YF100处理下分别较对照显著增加了 7.05％、13.27％和9.19％;叶面积在7月、8月YF50和YF100处理下较对照显著增加;叶片净光合速率(Pn)均较对照有所提升,YF50和YF200处理较对照显著提高,但发酵液处理之间差异不显著;蒸腾速率(T)在3个处理下均显著提高,而胞间CO2浓度(Ci)在YF50、YF100处理下显著降低,气孔导度(Gs)无显著差异;叶片绿色度(SPAD)在6、7月YF50和YF100处理下均较对照有所提升;叶片相对含水量(LRWC)在YF100处理下较对照显著提高;SOD和PPO活性在YF50和YF100处理下均较对照显著提升,PAL活性在各处理下均较对照有所提高;各处理下优果质量、每公顷产量和优果率均较对照有所提高,非商品果质量有所降低,尤其在YF50和YF100处理下差异显著;此外,总糖含量在3个处理下均较对照有所提升,糖酸比和可滴定酸含量在YF50处理下较对照也有所差异,但各处理之间差异不显著.[结论]放线菌发酵液肥可促进枣树生长,改善生理功能,并提高果实的产量和品质.其中,以放线菌发酵原液稀释100倍的效果最佳.建议可在南疆沙区骏枣园实际生产中,单独或者结合保花保果及病虫害防治喷施3～5次.

摘要：[目的]探究丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)对苹果砧木M9-T337耐盐碱性的影响机制.[方法]以1年生M9-T337幼苗为材料,采用盐碱胁迫(NaCl∶NaHCO2=1∶1,pH=8.36)结合AMF接种处理,分析其对幼苗生长、离子平衡及抗氧化系统的影响.[结果]AMF显著缓解盐碱胁迫对植株生长的抑制,使地上部和根系生物量分别显著提高17.13％和30.06％.通过调控MdSOS2、MdNHX2和MdGORK1基因表达,AMF促进Na-外排和液泡区隔化,降低叶片Na+含量并维持K+吸收,使Na+/K+比值显著下降28.96％.同时,AMF增强抗氧化酶活性及提高AsA-GSH循环效率,减少H2O2和O2-·积累,缓解氧化损伤.[结论]AMF通过协同调控离子平衡与抗氧化系统,打破盐碱胁迫下"离子毒害-氧化损伤"恶性循环,显著提升M9-T337的耐盐碱性,为盐碱地果园菌根共生技术的应用提供理论依据.

摘要：紫钻是广西壮族自治区农业科学院园艺研究所选育的无花果新品种.成熟果实果皮为紫色至黑色,果肉粉红至紫红色,果实球形,果柄短,果脉明显,有果点,空腔极小,果目闭合,可溶性固形物含量(w,后同)可超过20％.该品种与日本紫果相比,丰产性好,成熟早,平均单果质量40～60 g,当年平均单株产量18 kg,每666.7 m2产量1980 kg.在广西南宁种植,1月中旬修剪,6月中旬即可成熟,果期较长,有生长夏、冬果特性.适应性良好,适宜在广西、广东、海南及长江以南的其他地区采用避雨设施栽培.

摘要：秋悦是以优质桃品种秋燕与高抗寒野生半栽培品种东合1号为亲本,杂交选育而成的晚熟、抗寒新品种.果实圆形,果顶圆平,缝合线浅,两侧对称,平均单果质量334 g.果实完全成熟时果皮底色呈黄白色,果面90％以上着红色,茸毛较短;果肉白色,硬溶质,风味甜,汁液含量中等,可溶性固形物含量(w,后同)13.6％果实硬度13.2 kg·cm-2,黏核.蔷薇型花,花粉量大,自花结实.树势强健,树姿半开张.在唐山、秦皇岛地区,该品种于4月中旬盛花,9月中下旬果实成熟,果实发育期约150 d.抗寒性强,产量高且稳定,适宜在河北省秦皇岛市昌黎县、青龙县,唐山市滦南县及生态条件类似地区栽培.

摘要：有机酸是果实风味品质的重要组成部分,对保鲜和抗病性也具有重要作用.有机酸还能促进入体消化、调节代谢和提高抗氧化能力.本文对主要园艺植物果实中有机酸的类型和含量、有机酸合成和降解及有机酸转运等进行了综述.总结出目前多数水果中的有机酸以苹果酸和柠檬酸为主.有机酸积累关键基因的挖掘以合成和降解途径为主,利用正向遗传学挖掘有机酸积累主效功能结构基因及调控基因报道较少,有机酸积累的机制尚有待深入解析.展望未来,基础研究方面应重点明确环境信号对有机酸影响的规律,揭示物种驯化过程中有机酸物质的代谢规律,挖掘主效结构基因,解析关键转录因子的调控机制;应用研究方面应关注现有高酸特异种质及调控甜酸品质的栽培措施的开发和利用.

摘要：[目的]探究花粉直感效应对金沙柚坐果率和果实品质的影响,综合评价坐果率和果实品质,为选择适宜的金沙柚授粉父本提供数据支撑.[方法]在2021年和2023年选择马家柚、红肉蜜柚、三红蜜柚、金兰柚、鸡尾葡萄柚等10个不同柚类品种对金沙柚进行授粉处理,通过坐果率和果实品质、变幅系数和主成分分析对12项果实品质性状指标进行综合评价.[结果]采用不同授粉品种对金沙柚授粉,其坐果率、单果质量、果皮厚度、果皮CCI值、可食率、出汁率、囊瓣数、可滴定酸含量、可溶性糖含量、可溶性固形物含量、维生素C含量、固酸比共12项品质指标在不同组合间差异显著,变幅为12.92％～3 487.10％,受父本影响程度较大.对上述品质指标进一步进行主成分分析(PCA),累计贡献率均在93.00％以上.主成分分析结果显示,马家柚、红肉蜜柚及沙田柚排名靠前.[结论]异花授粉可以显著提高金沙柚坐果率,适宜的授粉品种对金沙柚的坐果率和果实品质指标有显著影响,表明可以通过花粉直感效应在一定程度上快速改善金沙柚的综合品质,为金沙柚栽培管理提供理论依据和参考价值.

摘要：中油19号为黄肉油桃品种,由中国农业科学院郑州果树研究所选育而成,在郑州地区于6月上中旬成熟.平均单果质量210 g,果形端正,果面着色艳丽,果肉硬,黏核,可溶性固形物含量(w,后同)11.7％～15.9％,品质优良.花瓣粉色,5枚,花粉多,自花结实.该品种适合在各桃主产区栽培,适应性较强.

摘要：金猕4号是由桂海4号自然授粉后实生选育出的早熟黄肉中华系猕猴桃新品种.果实椭圆形,果体饱满,平均单果质量86.35 g,果形指数为1.64,果皮绿褐色,果肉金黄色.软熟果实可溶性固形物含量(w,后同)22.41％,总糖含量15.20％,总酸含量0.93％,维生素C含量1390 mg·kg-1.常温下可存放30 d以上,在(1.0±0.5)℃贮藏条件下可存放90～120 d.在陕西关中地区,盛花期为4月下旬,果实成熟期为9月中旬,果实生长发育期为140～145 d;萌芽率83.23％,成枝率59.11％,结果枝率83.47％,以短果枝结果为主(67.14％).树势健壮,具有较强的耐热、耐寒能力.适宜陕西秦岭北麓和汉丹江流域低海拔区域及同类型气候区栽植,盛产期产量27.90 t·hm-2.

摘要：[目的]探究耐碱嗜盐微生物水制剂对盐碱胁迫条件下杜梨(Pyrus betulifolia Bunge)幼苗的促生效果,为盐碱地微生物改良技术的应用提供理论基础.[方法]以杜梨为试验材料,通过模拟黄河三角洲滨海盐碱地土壤盐成分,设置清水对照(CK)、盐碱胁迫(SA)和耐碱嗜盐微生物水制剂+盐碱胁迫(HSA)3个处理,研究耐碱嗜盐微生物水制剂对盐碱胁迫下杜梨幼苗生长及叶绿素荧光特性的影响.[结果]盐碱胁迫显著抑制杜梨幼苗生长:叶片绝对生长量、叶片干质量和根干质量分别下降82.76％、12.57％和26.71％;叶绿素含量(SPAD值、叶绿素a/b及总含量)显著降低;PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)和光合性能指数(PIABS)分别下降14.41％和76.63％;同时超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高,但过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性降低.施用耐碱嗜盐微生物水制剂后,幼苗生长状况得到明显改善,SPAD值和叶绿素含量均显著恢复,Fv/Fm和PIABS分别提高2.34％和12.43％,叶片SOD和POD活性分别增强23.19％和78.33％.此外,快速叶绿素荧光诱导动力学曲线(OJIP)分析显示,盐碱胁迫使得叶片OJIP曲线发生明显变化,导致K点出现和ΔVK值升高,而微生物调节剂的施用有效缓解了这些指标的变化,减轻了盐碱胁迫对PS Ⅱ供体侧放氧复合体(OEC)和受体侧电子传递的损伤.[结论]通过增施耐碱嗜盐微生物水制剂可有效缓解光合色素降解与光系统损伤,改善光合性能,增强抗氧化防御能力,减轻盐碱胁迫对杜梨幼苗造成的损害,提升杜梨幼苗的耐盐碱能力,为滨海盐碱地生态修复及杜梨耐盐碱栽培提供技术依据.

摘要：[目的]了解生长素极性转运蛋白PIN编码的基因在石榴基因组中的分布,分析其系统发育关系和组织表达特性,并探究外源生长素对PIN在籽粒发育过程中的表达特征及其对籽粒发育的影响,筛选石榴种皮发育相关的PIN基因.[方法]通过生物信息学方法鉴定出石榴PIN家族成员,并对其进行理化性质分析、启动子顺式作用元件预测、进化树构建和组织表达特性分析.通过荧光定量分析候选PIN基因响应外源生长素的表达模式,同时测定外源NAA处理后果实及籽粒形态指标、内种皮中PgrPIN基因的相对表达水平.[结果]从石榴全基因组中共鉴定到15个PIN家族成员,包括7个经典型和8个非经典型,其编码氨基酸数量为267～667个,蛋白质分子质量范围为29.62～74.79 kDa,等电点在6.29～9.80之间,大多数成员在质膜上发挥作用.石榴PIN基因启动子中存在大量的激素响应元件、光响应元件和胁迫响应元件.利用转录组数据分析了PgrPINs基因在石榴不同组织、不同发育时期的表达情况,筛选出了5个参与石榴种皮发育的候选基因,其中PgrPIN1、PgrPIN3、PgrPIN5和PgrPIN14可响应外源生长素.外源NAA处理授粉后15 d的幼果可促进果实发育,并显著促进发育后期PgrPIN1、PgrPIN5和PgrPIN14基因的表达.果实发育过程中PgrPIN1的表达量变化与内、外种皮大小,籽粒和果实大小呈显著正相关,与籽粒硬度呈显著正相关.[结论]石榴全基因组中共鉴定到15个PIN家族成员,其中PgrPIN1是参与石榴籽粒、果实大小发育以及籽粒硬度形成的重要候选基因,为研究石榴种皮发育调控机制提供了基因资源和理论基础.

摘要：冀星2号是从黄骅冬枣中选育出的芽变优良极晚熟冬枣新品种.果实长圆形,果皮较薄、暗红色,果肉黄白色,肉质酥脆,汁液多、风味甜;平均单果质量30.81 g,平均果形指数1.10,整齐度0.77.完熟期枣果可溶性固形物含量(w,后同)29.04％,果实去皮硬度6.08 kg·cm-2,维生素C含量(可食部分)353 mg·100 g-1,可食率97.60％,品质优.果实发育期为112～117 d,在河北省沧州市地区10月中旬完全成熟,较黄骅冬枣晚熟7～10d;花量少,枣吊着生花序5～10个,每序着生1～3朵,坐果率高;成枝力弱,结果枝组节间较短;枣吊木质化程度高.抗盐碱、耐瘠薄.适宜在河北省沧州市及相似气候类型区栽培.大树高接当年结果,高接换头3 a(年)进入丰产期,具有丰产、稳产特性.

摘要：渝果1号是从野生桑自然杂交的桑种子繁育的实生桑,经单株选优、定向培育而成的高产、优质果叶兼用桑树新品种.该品种树型高大开展,枝条粗壮直立,侧枝多,发条力强.果实呈紫黑色,圆筒形(果纵径3.16cm,横径1.63cm),平均单果质量3.96 g.渝果1号平均坐果率91.01％,果实年均产量为39.38 t·hm-2,桑叶年均产量为20.84 t·hm-2.果实糖度9.5°Brix,还原性糖含量(w,后同)2.91％,总酸含量3.56g·kg-1、花色苷含量0.10％,多酚含量4.25 mg·g-1、总黄酮含量5.26 mg·g-1,蛋白质含量12.12％,榨汁率64.49％,品质优良.在育成地区,渝果1号的花期为3月10-30日,桑椹成熟期为4月中下旬,枝条挂果多,观赏性极强.渝果1号适宜在长江、金沙江和黄河流域种植,具有良好的丰产性.

摘要：穗白1号是从广州本地红肉番石榴实生繁殖群体中优选培育而成的新品种.经连续多年多代嫁接培育,其综合性状表现优良.平均单果质量225.0 g,果实椭圆形,果形指数1.19;果皮黄绿色,有光泽;果肉白色,肉质嫩滑;种子少,不规则,中等硬度,浅黄色;口味甜酸,香气浓.果实可溶性固形物含量(w,后同)11.0％,可溶性糖含量7.7 g·100 g-1,总糖含量7.9g·100g-1,总酸含量3.16 g·kg-1,维生素C含量176.6 mg·100 g-1,品质优.该品种的果实生长期随季节的差异而不同,夏季谢花后至果实成熟70～90 d,冬季谢花后至果实成熟110～130 d.穗白1号番石榴具有稳定的品种特性,其无性繁殖后代具有果实疏松、品质优、口感好、香气浓、丰产稳产等特性,值得大力推广栽培.

摘要：[目的]灰斑病是枇杷生产中对产量和品质影响最为严重的病害之一,探讨枇杷抵御灰斑病菌侵染的分子机制,并筛选灰斑病菌侵染枇杷叶片时的应答基因,为抗性育种提供基因基础.[方法]利用田间调查及人工离体叶片接种的方法,对收集保存的52份枇杷种质的灰斑病抗性进行评价;以接种灰斑病菌后33、36和48 h的枇杷幼嫩叶片为试材,利用转录组测序技术对枇杷抗灰斑病相关基因和代谢途径进行分析.[结果]在52份枇杷种质中,田间调查和人工离体接种结果一致的有11份.接种后33、36和48 h在抗感品种中共检测到684个差异表达基因,其中上调基因为585个,下调基因为99个,一共有25个(12个上调和13下调)差异表达基因仅在抗病品种白梨的3个处理中差异表达.GO富集分析结果显示,枇杷叶片响应灰斑病侵染的差异表达基因,主要集中在对外源性刺激的反应、植物型次生细胞壁生物发生和光合作用光反应等过程中.KEGG富集分析结果显示,高抗与高感种质的差异表达基因多数富集在次生代谢产物的生物合成、MAPK信号通路-植物以及植物-病原体相互作用等通路.WRKY40-like等7个基因的RT-qPCR验证结果与RNA-seq数据一致,且这些基因在接种后33、36和48 h均能响应灰斑病菌的侵染.[结论]从转录组水平上分析了枇杷响应灰斑病菌侵染过程中的一些关键基因,其中高抗种质的差异表达基因中存在AP2/ERF类转录因子和3个抗病基因.本研究结果将有助于优化枇杷抗灰斑病菌的调控机制,为深入探究枇杷与灰斑病病原菌互作分子机制提供参考依据.

摘要：[目的]呼吸爆发氧化酶(respiratory burst oxidase homolog protein,RBOH)是一种酶复合物,其催化作用受RBOHs关键合成基因的限制,同时与氧气消耗的突然增加、活性氧(ROS)积累关系密切,在调控植物的各种发育过程和应激反应中发挥着关键作用.构建盐胁迫下葡萄酵母核文库系统,以探索RBOH基因参与葡萄应对非生物胁迫等分子调控机制.[方法]以150mmol·L-1NaCl溶液对6年生的巨峰葡萄进行浇盐处理,12 h后收集葡萄根、茎、叶和果实样品,采用Gateway技术构建酵母单杂交(yeast one-hybrid,Y1H)核文库系统;使用血细胞计数器计量文库酵母滴度.利用Y1H和高通量测序技术(next-generation sequencing,NGS)筛选互作蛋白.在氨基酸缺陷培养基中添加3-氨基-1,2,4-三唑(3-amino-1,2,4-triazole,3-AT)对启动子进行自激活验证和浓度筛选.使用基因本体论注释(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)数据库对筛选基因进行富集分析和注释.[结果]容量检测结果显示,该文库酵母滴度为1.4×109 CFU·μg-1(菌落形成单位),插入片段长度500～2000 bp,重组率为100％.成功分离出长度为1070 bp的VvRBOHA启动子序列,并通过在线工具预测该序列具有多个顺式作用响应元件结合位点,包括多种激素如脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸、乙烯,盐胁迫响应元件,以及MYB和W-box结合位点;利用该启动子筛选出1516个候选互作靶蛋白,其中转录因子有278个,激酶相关蛋白达405个.随机克隆8个高通量测序读数较高的候选蛋白并进行酵母回转验证试验,结果显示所有蛋白质与VvRBOHA启动子存在相互作用,表明利用该文库进行酵母单杂交筛选候选蛋白效率较高.[结论]成功构建了具有大容量和合适插入片段的酵母杂交文库,并利用该文库进行酵母单杂交筛选候选蛋白效率较高,并成功鉴定出与VvRBOHA启动子存在相互作用的多个候选转录因子.以上研究成果为葡萄应对非生物胁迫的调控策略开辟了新思路.