C基因型多重耐药乙型肝炎病毒稳定复制表达小鼠模型的建立
刘璐洁1
杨悦2
余双庆3
许智慧2
赵丽2
刘新光4
吴小兵3
徐东平2
董小岩3
刘妍2
1.523808 东莞,广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室;100039 北京,中国人民解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心2.中国人民解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心, 北京,1000393.五加和分子医学研究所有限公司, 北京,1001764.广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室, 东莞,523808
摘要：目的 建立高嗜肝性重组8型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 8,rAAV8)介导的C基因型多重耐药乙型肝炎病毒(multidrug resistant hepatitis B virus,MDR HBV)稳定复制表达小鼠模型.方法 分别构建rAAV8-1.3倍C基因型多重耐药型(HBV逆转录酶区含有rtL180M+S202G+M204V+N236T位点)和野生型HBV重组质粒,然后包装纯化并筛选高滴度重组病毒(rAAV8-1.3HBV-C-MDR和rAAV8-1.3HBV-C-WT),将病毒经尾静脉注射至6～8周龄的C57BL/6小鼠,建立C基因型多重耐药型(实验组,n=6)和野生型(对照组,n=6)HBV稳定复制表达小鼠模型,监测病毒复制和抗原表达至9周并于第9周末处死小鼠,取肝脏组织进行HE染色和免疫组化染色,观察肝组织病理改变并分析HBsAg和HBcAg的表达.结果 小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA表达较稳定,实验组和对照组小鼠血清HBV DNA波动范围分别为3.67～4.06 lg IU/ml和4.36～5.11 lg IU/ml.血清HBsAg和HBeAg在观察期间均高表达,第2周实验组和对照组血清HBsAg和HBeAg OD值分别为3.501±0.230和2.989±0.250,3.967±0.230和3.384±0.230.2组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBsAg和HBcAg蛋白表达.结论 利用高嗜肝性rAAV8载体携带1.3倍C基因型MDR HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功建立了稳定复制并持续表达C基因型MDR HBV的小鼠模型,为后续评价抗MDR HBV药物疗效提供实验平台.
关键词：多重耐药突变乙型肝炎病毒病毒复制抗原表达小鼠模型
分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81371852)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 532-536 )
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