CCHFV S基因的重组杆状病毒的构建及鉴定
思越
宋曦玉
杨继磊
雷迎峰
张芳琳
程林峰
1.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室2.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室3.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室4.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室5.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室6.710032 西安,空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室
摘要：目的 利用杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector systems,BEVS)构建含有克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)S基因的重组杆状病毒,并在sf9昆虫细胞中表达出核衣壳蛋白(nucleoprotein,NP).方法 将合成的CCHFV S基因定向克隆入杆状病毒转移载体pFastBac?Dual,获得重组的转移载体pFastBac?Dual-CCHFV-S.将其转化到E.coli DH10Bac?感受态细胞中,筛选得到重组杆状病毒杆粒rBV-Bacmid-S.用Cellfectin?Ⅱ试剂将rBV-Bacmid-S转染入sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒rBV-CCHFV-S.通过IFA和Western blot检测CCHFV S基因的表达.结果 构建了含有S基因的rBV-CCHFV-S,在sf9昆虫细胞中成功表达CCHFV NP.结论 利用BEVS可以成功表达CCHFV NP,这为研究CCHFV NP的生物学特性,研制特异性的治疗药物和预防控制疫苗奠定基础.
关键词：克里米亚-刚果出血热病毒杆状病毒表达系统核衣壳蛋白
分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：陕西省社会发展科技攻关项目(2016SF-128)空军军医大学军事医学提升计划(2016TSB-013)
论文发表日期：2020-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 407-411,415 )
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