汉滩病毒感染诱导血管内皮细胞多糖包被损伤及其机制初步研究
杜虹
王晓艳
李璟
姜泓
申焕君
王平忠
1.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科2.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科3.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科4.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科5.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科6.710038 西安,空军军医大学第二附属医院传染科
摘要：目的 探讨汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)感染血管内皮细胞致多糖包被(glycocalyx,GCX)损伤的分子机制.方法 利用HTNV感染人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),在感染不同时间段,ELISA检测细胞上清中GCX组分(硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、透明质酸、可溶性CD138和磷酯酰肌醇聚糖),实时定量PCR和Western blot检测蛋白聚糖中核心蛋白(CD138、磷酯酰肌醇聚糖和CD44)及相关分解酶(乙酰肝素酶、中性粒细胞弹性蛋白酶和透明质酸酶)的表达,间接免疫荧光检测糖蛋白的分布情况,跨内皮电阻检测细胞通透性变化.结果 HTNV感染HUVECs后,随着感染时间的延长,释放至细胞上清液中的粘多糖成分(硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、透明质酸)逐渐增多.与其相连的核心蛋白在细胞中表达亦逐渐增多,其中CD138和磷酯酰肌醇聚糖mRNA的表达水平上升,在48 h和72 h分别上调3.68倍和2.47倍(P均<0.05),蛋白表达水平也出现上升.免疫荧光检测结果显示HTNV感染后细胞上糖蛋白表达减少.同时,乙酰肝素酶和中性粒细胞弹性蛋白酶mRNA表达水平出现上升,在48 h和24 h分别上调2.23倍和2.76倍(P均<0.05).跨内皮电阻检测结果显示,弹性蛋白酶抑制剂(1μM)预处理后跨内皮电阻值上升.结论 HTNV感染可能引起血管内皮细胞GCX损伤,通过上调或活化某些脱落酶,酶解GCX,致屏障结构破坏和通透性增加,为阐明HTNV感染致血管内皮损伤的分子机制提供了重要资料.
关键词：汉滩病毒人脐静脉血管内皮细胞多糖包被通透性
分类号：R512.8(传染病)
资助基金：空军军医大学第二附属医院科技创新发展基金(2019LCYJ011)空军军医大学第二附属医院科技创新发展基金(2019LCYJ002)国家自然科学基金(81373118)国家科技重大专项(2017ZX10204401-002-005)
论文发表日期：2021-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 39-43,49 )
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