豨莶丸治疗类风湿关节炎的分子机制:基于蛋白质组学
李亚辉1
杨欣2
姚血明3
黄聪4
1.贵州中医药大学 信息工程学院,贵州 贵阳 5500252.贵州中医药大学 基础医学院,贵州 贵阳 550025;贵州省高等学校中药(民族药)药性与效应研究重点实验室,贵州 贵阳 5500253.贵州中医药大学 第二附属医院,贵州 贵阳 5500254.贵州中医药大学 基础医学院,贵州 贵阳 550025;贵州中医药大学 第二附属医院,贵州 贵阳 550025
摘要：目的 基于蛋白质组学分析豨莶丸(XXW)治疗类风湿关节炎(RA)的分子机制.方法 复制大鼠胶原诱导关节炎模型,48只大鼠适应环境后随机分为6组(8只/组),造模成功2周后灌胃豨莶丸进行干预,豨莶丸低、中、高剂量换算后灌胃给药分别为200、400、800 mg/kg,雷公藤多苷片(LGTDGP)9 mg/kg,1次/d.正常对照组和模型对照组灌胃等体积 1%羧甲基纤维素钠,连续灌胃给药3周.采用ELISA试剂盒测定大鼠血清中IL-10、IL-6、TNF-α 的含量.基于串联质谱标签(TMT)技术筛选豨莶丸高剂量组与模型组间的差异表达蛋白,通过R软件分析核心靶标及信号通路.基于ggplot2、tidyverse等数据处理与可视化包,对免疫细胞浸润数据及相关基因表达数据进行整合处理,计算核心靶点与各类免疫细胞(如 T细胞、B细胞、巨噬细胞等)的相关性.采用免疫组化和免疫荧光验证核心靶点的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6的含量明显升高(P<0.01),IL-10含量降低(P<0.01);与模型组比较,雷公藤多苷片、豨莶丸高剂量、中剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-6的含量降低(P<0.01,P<0.05),IL-10含量增加(P<0.05,P<0.01).蛋白质组学分析发现模型组和豨莶丸高剂量组交集出160个差异蛋白,趋化因子(CCL5),信号转导与转录激活因子1(STAT1),颗粒酶 B(GZMB)和白介素7受体(IL7R)为核心靶点.CCL5、STAT1的ROC曲线下面积大于0.9.4个核心靶点(CCL5,STAT1、GZMB、IL7R)与中央记忆 CD4 T细胞、效应记忆CD4 T细胞、骨髓源性抑制细胞等呈正相关(P<0.05).免疫组化及免疫荧光分析发现,与空白对照组比较,模型组大鼠踝关节中CCL5、STAT1蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,经豨莶丸治疗后CCL5、STAT1蛋白表达水平降低(P<0.01).结论 豨莶丸对CIA大鼠具有关节保护作用,通过降低血清中促炎因子IL-6、TNF-α的含量,同时升高抗炎因子IL-10的水平,减轻炎症反应,其机制与调控CCL5,STAT1等蛋白的表达相关.
关键词：豨莶丸类风湿关节炎蛋白质组学免疫细胞浸润
论文发表日期：2025-11-20
在线出版日期：2025-12-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 2330-2339 )
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