丝氨酸蛋白酶抑制剂E1过表达通过诱导M2型巨噬细胞极化促进三阴性乳腺癌细胞增殖与紫杉醇耐药
张芡1
刘博文1
雷丽1
王晔1
张馨月1
毛樟坤1
唐鹏2
张金梅2
杨佳宜1
彭彦茜3
刘泽4
1.湘南学院 附属医院(临床学院),湖南 郴州 4230002.湘南学院 药学院,湖南 郴州 4230003.湘南学院 公共卫生学院,湖南 郴州 4230004.湘南学院 护理学院,湖南 郴州 423000
摘要：目的 探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E1(SERPINE1)对三阴性乳腺癌细胞肿瘤免疫微环境的影响及其与紫杉醇(PTX)耐药性的关系.方法 采用0～40 µmol/L的PTX处理三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,并利用CCK-8法测定PTX对MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度(IC50 值).通过低剂量逐步递增的方法,在体外建立PTX耐药模型(MDA-MB-231/PTX).分别将SERPINE1过表达质粒或SERPINE1 siRNA转染至野生型和耐药型MDA-MB-231细胞株,以实现SERPINE1的过表达或敲低.采用Western blotting检测各组细胞中SERPINE1的表达水平,以评估转染效率.利用Hoechst 33258染色法评估细胞凋亡情况,并通过Western blotting测定凋亡相关的活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase 3)的表达水平.采用EdU和CCK-8法检测细胞增殖活力.将各组乳腺癌细胞与巨噬细胞共培养后,利用流式细胞术和Western blotting检测巨噬细胞的M1、M2极化水平,并计算M1/M2值.进一步构建裸鼠皮下移植瘤模型,通过监测肿瘤生长及免疫组化染色验证其体内作用.结果 SERPINE1的过表达抑制MDA-MB-231细胞的凋亡并促进细胞增殖(P<0.01),而敲低SERPINE1则促进MDA-MB-231/PTX细胞的凋亡并抑制细胞增殖(P<0.01).此外,SERPINE1高表达的乳腺癌细胞有助于巨噬细胞向M2型极化、抑制M1极化、降低M1/M2比值(P<0.01).体内移植瘤实验同样证实,过表达SERPINE1促进肿瘤生长(P<0.01).结论 在MDA-MB-231三阴性乳腺癌细胞中,SERPINE1的过表达促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,并增强对PTX的耐药性.SERPINE1参与调控乳腺癌微环境中巨噬细胞的极化状态,促进M2型巨噬细胞的极化.
关键词：三阴性乳腺癌丝氨酸蛋白酶抑制剂E1紫杉醇耐药肿瘤免疫微环境M2型巨噬细胞极化
资助基金：湖南省自然科学基金区域联合基金项目(2023JJ50412)湖南省教育厅科学研究重点项目(23A0596)湖南省大学生创新训练计划项目(4861)
论文发表日期：2025-12-20
在线出版日期：2025-12-31（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 2551-2560 )
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