敲低Cav1基因可抑制小鼠肝细胞线粒体功能及关键基因mRNA的m6A修饰和表达
丁珊珊1
廖颖1
白雪1
黄娇阳1
浅川哲也2
1.福建中医药大学中医学院,福建 福州 3501222.福建中医药大学中医学院,福建 福州 350122;日本滨松医科大学神经外科系,日本 静冈 43131
摘要：目的 探讨Cav1对小鼠肝细胞线粒体功能和mRNA的m6A甲基化修饰及表达水平的影响.方法 采用慢病毒转染敲低小鼠肝细胞AML12中Cav1基因的表达(shCav1组),转染阴性对照病毒作为对照组.采用TMRE荧光探针检测线粒体膜电位变化,结合Seahorse能量代谢分析系统检测线粒体呼吸功能.采用甲基化RNA免疫共沉淀技术(MeRIP)联合m6A表观转录组芯片检测mRNA的m6A甲基化修饰和表达水平变化,通过富集分析筛选线粒体功能相关基因,并用qPCR验证目标基因mRNA的m6A修饰和表达水平.结果 与对照组相比,shCav1组线粒体膜电位(P<0.05)和线粒体呼吸能力降低(P<0.01).m6A表观转录组芯片检测结果显示,shCav1组有7814个mRNA的m6A甲基化修饰水平发生变化(变化倍数>1.5,P<0.05),其中152个上调、7662个下调.联合表达差异分析显示,有2497个mRNA的m6A甲基化修饰和表达水平存在协同变化.协同变化的mRNA富集到氧化磷酸化通路,其中Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m6A甲基化修饰变化百分比最高.芯片和qPCR结果均显示shCav1组中Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m6A修饰和表达水平均较对照组降低(P<0.05).结论 Cav1敲低的小鼠肝细胞mRNA的m6A甲基化修饰变化显著,该变化与mRNA的表达有关,Cav1对线粒体功能的调节作用可能依赖于其对Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m6A修饰调控.
关键词：Cav1基因m6A RNA甲基化mRNA表达线粒体膜电位线粒体呼吸
论文发表日期：2025-12-20
在线出版日期：2025-12-31（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 2607-2615 )
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