血管相关迁移细胞蛋白在肝细胞癌中高表达并促进肝癌细胞侵袭转移
李超1
殷国志2
程萧3
姜业臻4
1.首都医科大学附属北京朝阳医院普外科,北京 1000242.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西 西安 7100613.通用环球西安北环医院普通外科,陕西 西安 7100324.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西 西安 710061;通用环球西安北环医院普通外科,陕西 西安
摘要：目的 研究血管相关迁移细胞蛋白(AAMP)异常高表达在肝细胞癌(HCC)中的临床意义和对肝癌细胞侵袭转移的影响.方法 基于网络数据库中HCC队列资料分析AAMP基因在肝癌和癌旁组织中的表达差异以及与临床分期和预后的关系.免疫组化检测60对HCC及癌旁组织标本中AAMP表达,分析AAMP表达与患者临床病理特征的相关性.通过慢病毒转染下调HCC细胞(Mahlavu和Huh-7)内AAMP表达水平.EdU掺入实验、流式细胞仪、划痕愈合实验、transwell迁移/侵袭小室和裸鼠肺转移瘤模型分别检测敲低AAMP表达对HCC细胞体外增殖、凋亡、迁移、侵袭和体内肺转移能力的影响.Western blotting和免疫荧光检测上皮间质转化标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail表达情况.RT-qPCR和Western blotting检测敲低AAMP对RhoA mRNA和蛋白表达的影响.分别使用MG-132和CHX处理敲低AAMP的HCC细胞,Western blotting检测细胞内RhoA蛋白表达变化.免疫组化染色分析HCC组织中AAMP和RhoA蛋白的表达相关性.结果 生物信息学分析显示,AAMP基因表达水平在HCC组织中升高(P<0.05),AAMP高表达与患者临床分期较晚和不良预后相关(P<0.05).免疫组化结果显示,HCC组织的AAMP染色评分高于对应癌旁组织(P<0.05),AAMP高表达与Edmondson-Steiner分级(III+IV)、血管侵犯及TNM分期(III+IV期)相关(P<0.05).敲低AAMP对HCC细胞增殖和凋亡无显著影响(P>0.05),但能抑制HCC细胞的迁移、侵袭和体内肺转移能力(P<0.05).敲低AAMP后HCC细胞内E-cadherin蛋白表达升高而N-cadherin、Vimentin和Snail的表达水平降低(P<0.05),相应蛋白的免疫荧光染色强度变化趋势与Western blotting检测结果一致.敲低AAMP对RhoA基因mRNA表达水平无显著影响(P>0.05),但降低了RhoA蛋白的表达量(P<0.05),并且MG-132处理阻断了敲低AAMP导致的RhoA蛋白表达下调(P<0.05).相关性分析显示,HCC组织内AAMP和RhoA蛋白的表达水平呈正相关关系(P<0.05).结论 AAMP高表达与HCC恶性临床特征密切相关,AAMP可能通过维持RhoA蛋白稳定表达来促进HCC细胞发生上皮间质转化,进而增强HCC的侵袭转移能力.
关键词：血管相关迁移细胞蛋白肝细胞癌上皮间质转化侵袭转移RhoA
资助基金：陕西省自然科学基础研究计划资助项目(2021JQ-397)北京市医院管理中心青苗人才计划(QML20210903)
论文发表日期：2025-12-20
在线出版日期：2025-12-31（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 2628-2638 )
英文信息