3-吲哚乙酸通过调控应激颗粒介导的NLRP3炎性小体激活减轻新生隐球菌诱导的脑微血管内皮细胞焦亡
陈晶宇
邹金虎
周炳亮
高雪锋
黄鹏伟
曹虹
南方医科大学公共卫生学院微生物学系//广东省热带病研究重点实验室,广东 广州 510515
摘要：目的 探究3-吲哚乙酸(IAA)通过调控应激颗粒(SGs)形成和炎症小体NLRP3激活来缓解新生隐球菌(Cn)诱导的脑微血管内皮细胞焦亡的作用机制.方法 采用107/mL浓度的Cn处理脑微血管内皮细胞构建体外细胞模型,并使用IAA进行干预.通过Western blotting、细胞免疫荧光、ELISA和CCK-8活性检测评估G3BP1、DDX3X、NLRP3及焦亡相关蛋白、细胞因子、细胞活性的变化.在免疫抑制的C57BL/6小鼠中,尾静脉注射Cn,连续7 d给予IAA灌胃治疗,构建体内动物实验模型.小鼠随机分为对照组、模型组及IAA处理组(3只/组).通过依文思蓝实验检测血脑屏障通透性,取小鼠大脑皮层组织检测相关蛋白表达情况.结果 Cn感染可诱导脑微血管内皮细胞中G3BP1表达下调(P<0.05)、DDX3X和NLRP3表达上调(P<0.05).IAA干预恢复了G3BP1、DDX3X和NLRP3的异常表达(P<0.05),有效抑制焦亡相关蛋白NT-GSDMD/GSDMD(P<0.05)和P20/Caspase1(P<0.01)的活化,大幅减少炎性细胞因子IL-18(P<0.001)、IL-1β(P<0.01)的释放.IAA干预可逆转Cn引起的脑微血管内皮细胞DDX3X向NLRP3的转移(P<0.05),促进DDX3X与G3BP1的结合(P<0.05).体内实验结果显示:IAA治疗可缓解血脑屏障的损伤,减少依文思蓝的渗出量(2.64±0.32 vs 1.06±0.12,P<0.001),和大脑皮层中ZO-1的表达量(P<0.05).同时有效抑制VEGFR2、G3BP1、DDX3X、NLRP3和焦亡相关蛋白NT-GSDMD/GSDMD、P20/Caspase1的异常表达(P<0.05).结论 IAA通过调控SGs的形成以及炎症小体NLRP3的活化,有效缓解Cn引起的脑微血管内皮细胞焦亡.
关键词：新生隐球菌焦亡3-吲哚乙酸应激颗粒NLRP3炎症小体
论文发表日期：2025-12-20
在线出版日期：2025-12-31（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 2679-2689 )
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