结直肠癌细胞分泌牙本质涎磷蛋白通过整合素αvβ3依赖途径诱导奥沙利铂耐药
刘超群1
宁紫燕2
吴江华1
刘魏魏2
林创3
许嘉玮4
周蕊1
赵亮1
1.南方医科大学南方医院 病理科,广东 广州 510515;南方医科大学基础医学院,广东 广州 5105152.南方医科大学基础医学院,广东 广州 5105153.南方医科大学南方医院 病理科,广东 广州 5105154.南方医科大学南方医院 神经内科,广东 广州 510515
摘要：目的 探索牙本质涎磷蛋白(DSPP)对结直肠癌奥沙利铂治疗效果的影响,及其作用机制,评估靶向DSPP对结直肠癌的治疗疗效.方法 将奥沙利铂耐药HCT8细胞(OxR/HCT8)、结直肠癌类器官(PDTOs)、HCT116及SW620细胞设为sgNC对照组与sgDSPP敲除组,以CCK-8实验检测敲除DSPP后细胞对奥沙利铂的敏感性;将HCT116、SW620细胞设为sgNC、sgDSPP敲除组,Caco2及HCT8细胞设为oeNC对照、oeDSPP过表达组、oeDSPP过表达+Cyclo(整合素αvβ3抑制剂)组,Western blotting验证OxR/HCT8中 DSPP的表达水平,DSPP过表达、敲除细胞株构建以及对MAPK信号通路的调控.体内实验:采用4～5周龄BALB/c-nu裸鼠构建皮下成瘤模型,随机分3组(5只/组):Glu对照组、L-OHP(奥沙利铂)组、L-OHP+α-DSPP(DSPP单克隆抗体)联合组,验证联合治疗疗效.构建结直肠癌PDX模型,其中3例以4～5周龄NOD-SCID小鼠分4组(5～6只/组):Glu组、α-DSPP组、L-OHP组、L-OHP+α-DSPP组,验证靶向DSPP对奥沙利铂敏感性的影响;其余2例分6组(4～6只/组),新增Cyclo组及L-OHP+Cyclo组,对比靶向DSPP与整合素αvβ3的作用差异.免疫荧光染色、Co-IP、免疫组织化学染色实验分析DSPP与整合素αvβ3相互作用;HE染色及免疫荧光实验验证类器官模型的成功构建;免疫组织化学染色分析DSPP在结直肠癌奥沙利铂治疗敏感与耐药患者中的表达强弱.结果 免疫组织化学染色结果显示,与对奥沙利铂敏感结直肠癌患者相比(n=30),DSPP表达水平在奥沙利铂耐药患者(n=30)中显著升高(P<0.001);OxR/HCT8细胞中DSPP表达上调,并且在OxR/HCT8细胞、CRC类器官模型、HCT116以及SW620细胞中敲除DSPP均能增加奥沙利铂敏感性;Co-IP及免疫荧光实验证实肿瘤细胞DSPP与整合素αvβ3二者间具有相互结合及共定位;免疫组织化学染色发现结直肠癌患者肿瘤组织中DSPP表达较高时,整合素αvβ3表达水平也相对较高;DSPP可以上调MAPK信号通路中ERK及P53的磷酸化水平,而整合素αvβ3抑制剂能有效逆转DSPP的这一调控作用;裸鼠及PDX模型证实靶向DSPP及整合素αvβ3可以抑制肿瘤的生长(P<0.05),减小肿瘤的重量(P<0.05),增加结直肠癌奥沙利铂疗效(P<0.05),而DSPP单克隆抗体的促进作用优于αvβ3靶向抑制剂.结论 DSPP通过整合素αvβ3调控结直肠癌奥沙利铂耐药的新机制,确立DSPP有望成为提高晚期结直肠癌患者对奥沙利铂治疗敏感性的新靶点.
关键词：结直肠癌化疗耐药牙本质涎磷蛋白整合素αvβ3
论文发表日期：2026-03-20
在线出版日期：2026-04-01（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 479-488 )
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