刺芒柄花素通过下调P53/SAT1/ACSL4介导的铁死亡改善新生小鼠缺氧缺血性脑损伤
郭涛1
陈柏霖2
杨逍3
赵艳丽2
李晓敏2
何佳浩3
石金沙2
左涵珺2
李娟娟2
1.昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明 650500;昆明理工大学基础医学院解剖学教研室,云南 昆明 6505002.昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,云南 昆明 6505003.昆明理工大学基础医学院解剖学教研室,云南 昆明 650500
摘要：目的 探讨刺芒柄花素(FMN)对新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的神经保护作用,并阐明其机制是否与调控P53/SAT1/ACSL4信号通路以抑制神经元铁死亡有关.方法 选取24只出生9～11 d的C57BL/6J新生小鼠,通过结扎左侧颈总动脉并置于低氧环境(92%N2,8%O2)中40 min以构建HIBD模型.造模成功后,将小鼠随机分为4组(n=6):假手术组(Sham)、模型组(HIBD)、FMN低剂量治疗组(HIBD+FMN-L,50 mg/kg)和高剂量治疗组(HIBD+FMN-H,100 mg/kg).腹腔注射给药,3 d后取脑皮层缺血半暗带组织进行检测.采用Western blotting和双重免疫荧光技术分析铁死亡通路关键蛋白P53、SAT1及ACSL4的表达水平;同时测定组织内亚铁离子(Fe²+)、超氧化物(DHE)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量,以评估铁死亡及相关氧化应激指标.体外选用HT22神经元,建立氧糖剥夺(OGD)模型并分组为:对照组(Control)、模型组(OGD)、FMN干预组(OGD+FMN,100 μmol/L)、P53激动剂Nutlin-3干预组(OGD+Nutlin-3,10 μmol/L)以及FMN与Nutlin-3联合处理组(OGD+FMN+Nutlin-3).在药物预处理1 h及OGD处理6 h后,检测上述铁死亡相关蛋白,并利用特异性探针或生化方法评估细胞内Fe²+(FerroOrange)、活性氧(DCFH-DA)、脂质过氧化(BODIPY-C11、MDA)、GSH水平、线粒体膜电位(JC-1)及细胞活性(CCK-8).结果 体内实验结果表明,与HIBD组相比,FMN治疗能够显著抑制P53、SAT1和ACSL4的蛋白表达(P<0.05),并有效改善铁死亡相关生化指标,具体为Fe²+、ROS和MDA含量显著降低,同时抗氧化物质GSH水平得以恢复(P<0.05).体外实验结果与体内发现相互印证,FMN处理缓解了OGD诱导的HT22细胞铁死亡,表现为铁死亡关键蛋白表达下调(P<0.05),Fe²+积聚、脂质过氧化和ROS水平受到抑制,并且GSH含量、线粒体膜电位及细胞活力得到显著改善(P<0.05).机制验证方面,当使用Nutlin-3特异性激活P53信号后,FMN所产生的上述保护效应均被明显逆转或削弱(P<0.05),P53信号在FMN抑制铁死亡过程中发挥重要的上游调节作用.结论 刺芒柄花素通过下调P53/SAT1/ACSL4通路介导的神经元铁死亡的途径,对新生小鼠HIBD产生神经保护效应.
关键词：刺芒柄花素缺氧缺血性脑损伤铁死亡P53SAT1ACSL4
论文发表日期：2026-03-20
在线出版日期：2026-04-01（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 604-614 )
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