黄芩清热除痹胶囊调控LncRNA EBLN3P/miR-369-3p/NFIX轴抑制JAK/STAT通路介导的类风湿关节炎滑膜血管新生
孙梦雨1
汪元2
刘菲菲1
1.安徽中医药大学第一临床医学院,安徽 合肥 2306012.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 230601
摘要：目的 研究黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控LncRNA EBLN3P/miR-369-3p/NFIX 轴干预类风湿关节炎(RA)中JAK/STAT驱动的滑膜血管生成的作用机制.方法 通过优化干预策略构建类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞/人脐静脉内皮细胞(RA-FLS/HUVEC)协同培养模型,采用梯度浓度含HQC血清(2.5%～30%,干预24～72 h)、LncRNA EBLN3P过表达及基因-药物联合处理,利用CCK-8法筛选共培养体系的最佳血清浓度与干预时长.通过EdU增殖实验、Transwell侵袭实验及细胞划痕实验评估HQC对RA-FLS病理活化的抑制作用,ELISA定量分析血管生成因子(VEGF、FGF2)及基质金属蛋白酶(MMP9、MMP2)表达水平,管腔形成实验联合免疫荧光技术检测RA-FLS诱导的HUVEC血管生成能力及内皮标志物(CD34、CD105)表达变化,qRT-PCR及Western blotting解析信号通路关键分子(LncEBLN3P、miR-369-3p、NFIX、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)的mRNA或蛋白表达动态.结果 共培养体系优化作用条件(细胞比例5:1,时间48 h)模型中,与对照组相比,模型组RA-FLS的恶性行为(增殖、侵袭及迁移能力)显著增强(P<0.01),促血管生成因子(VEGF、FGF2)与基质降解酶(MMP2、MMP9)表达显著上调(P<0.01),LncEBLN3P/miR-369-3p/NFIX轴异常激活,miR-369-3p表达受抑制(P<0.01),而LncEBLN3P、NFIX及下游JAK2/STAT3通路关键分子(JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)表达均显著升高(P<0.01).经HQC干预后,模型组RA-FLS恶性行为受抑(P<0.01),促血管因子及基质降解酶表达下调(P<0.01),且LncEBLN3P/miR-369-3p/NFIX-JAK/STAT轴被抑制(miR-369-3p表达升高,P<0.01;LncEBLN3P、NFIX、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3表达均下调,P<0.01).在LncRNA EBLN3P过表达(OE-Lnc)模型中,HQC仍可部分逆转其诱导的病理表型及通路激活(P<0.01 vs OE-Lnc组),但与单纯HQC处理组相比,OE-Lnc+HQC联合处理组对细胞恶性行为及通路活化的抑制作用显著减弱(P<0.01).结论 HQC含药血清可能通过靶向LncRNA EBLN3P/miR-369-3p/NFIX轴抑制JAK/STAT通路,从而抑制RA-FLS的促血管生成功能.
关键词：类风湿关节炎黄芩清热除痹胶囊滑膜血管新生竞争性内源RNA
资助基金：安徽省自然科学基金面上项目(2208085MH268)安徽省高等学校科学研究项目(2023AH050810)安徽省临床医学研究转化专项项目(202304295107020110)
论文发表日期：2026-03-20
在线出版日期：2026-04-01（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 675-685 )
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