纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
黄志立
罗立新
凌均建
杨汝德
梁世中
1.华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州 5106402.华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州 5106403.华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州 5106404.华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州 5106405.华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州 510640
摘要:利用PCR方法以分泌纳豆激酶的纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到质粒载体PUC19上,筛选重组子,通过限制性内切酶和PCR技术分析初步确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因。利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体,并在大肠杆菌中进行了表达,凝块溶解时间法(CLT)测出表达产物具有溶解血栓活性。在确定了最佳培养时间与诱导时间后,SDS-PAGE分析结果表明基因表达产物为分泌型,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右。
关键词:纳豆激酶基因基因克隆基因表达
分类号:R392.1(医学免疫学)
资助基金:广东省自然科学基金(980540)
论文发表日期:2000-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:1( 265-267,276 )
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广东药学院学报

广东药学院学报

ISSN:1005-4057
年,卷(期):2000,16(4)
所属栏目:论著