半乳糖凝集素-1通过激活AKT/mTOR信号通路促进肺腺癌细胞增殖转移
卢惠浩
黄楚红
程贞
董佳丽
陈玉婷
李姝君
苏文媚
杨志雄
广东医科大学附属医院肺部肿瘤专科,广东 湛江 524001
摘要：目的 探讨半乳糖凝集素-1(Gal-1)在肺腺癌中的作用及分子机制.方法 ⑴ 数据库信息分析:通过TCGA-肺腺癌数据库分析Gal-1表达水平与患者预后之间的关系.⑵ 细胞体外实验:①通过在肺腺癌细胞A549及H1299中转染siRNA,分为NC(阴性对照)组和实验组(siLGALS1-1、siLGALS1-2),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、集落形成实验检测Gal-1对肺腺癌细胞增殖能力的影响;②利用Transwell实验及划痕愈合实验考察Gal-1对肺腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响.⑶ 分子机制实验:应用通路富集分析、回补实验探讨Gal-1发挥功能的下游分子机制.⑷ 动物体内实验:分别将阴性对照组(n=5)和稳定低表达LGALS1组(n=5)肺腺癌细胞注射至4周龄雌性BALB/c裸鼠皮下,通过构建皮下瘤模型和免疫组织化学实验验证Gal-1在肺腺癌模型中的体内生物学功能.⑸ 临床样本验证:通过qRT-PCR及Western blot实验检测Gal-1在肺腺癌组织及癌旁组织中的总RNA及总蛋白表达量.结果 ⑴ TCGA-肺腺癌数据库生物信息分析结果表明Gal-1的mRNA高表达与患者不良预后相关(P<0.05).⑵ 体外实验表明,与NC组相比,敲低Gal-1可显著抑制肺腺癌细胞增殖能力(P<0.001)、显著抑制其集落形成能力(P<0.01)、显著抑制其迁移和侵袭的能力(P<0.05);而过表达Gal-1可显著促进肿瘤细胞的增殖(P<0.001)和转移(P<0.05).⑶ Gal-1相关差异表达基因富集在AKT/mTOR信号通路,过表达Gal-1的肺腺癌细胞中AKT和mTOR的磷酸化水平升高,并且应用mTOR抑制剂进行回补实验可显著逆转过表达Gal-1的促癌功能(P<0.01).⑷ 与阴性对照组相比,稳定低表达LGALS1组小鼠的皮下瘤生长速率、皮下瘤体积和质量均显著降低(P<0.05),小鼠皮下瘤组织中Ki67表达水平、AKT和mTOR的磷酸化水平均降低.⑸ 临床样本验证表明,与癌旁组织相比,Gal-1的RNA和蛋白水平在肺腺癌组织中显著升高(P<0.001).结论 Gal-1在肺腺癌中发挥重要的促癌作用,其机制可能通过激活AKT/mTOR信号通路促进肺腺癌细胞的增殖转移能力.
关键词：Galectin-1肺腺癌AKT/mTOR信号通路肿瘤进展非小细胞肺癌
资助基金：广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515110995)
论文发表日期：2025-10-30
在线出版日期：2025-10-31（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 495-505 )
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