荧光探针法研究阳离子多聚物基因载体Polybrene与DNA的相互作用
廖杰1
于冰2
丛海林2
刘虎威2
曹维孝2
1.解放军总医院医学实验测试中心,北京,1008532.北京大学化学与分子工程学院,分析化学研究所,教育部生物有机化学与分子工程重点实验室,北京分子科学国家实验室,北京,100871
摘要：目的:用荧光探针法研究海美溴铵(PB)和DNA之间的相互作用.方法:将一定量的PB溶液逐渐加入到DNA/溴化乙锭(EB)复合物的水溶液中,在535 nm处激发,测定595 nm的荧光强度,观察体系荧光强度随PB浓度变化而发生的改变.用同样的方法观察PB对Hoe-DNA和4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)-DNA体系荧光强度的影响,Hoe的激发和发射波长分别设置为350 nm和460 nm,DAPI为340 nm和450 nm.通过荧光Scatchard分析法获得PB对DNA的结合常数.结果:随着PB浓度的增加,EB与DNA的结合减弱.通过对PB存在下EB-DNA体系的荧光分析,获得了PB与DNA之间的结合常数为1.8×10./mol.PB的加入大大提高了Hoe-DNA体系的荧光强度,同时Hoe的最大发射波长由最初的490 nm蓝移至460 nm.Hoe-DNA体系和DAPI-DNA体系的荧光强度均随着聚合物单体的浓度与DNA磷酸基团的浓度比值(N:P比值)的增加而增加,并且在N:P比值等于或接近1.0时达到最大.结论:DNA与PB之间复合物的形成减弱了DNA与嵌入剂的结合,但却能增强DNA和沟区结合探针之间的相互作用.提示PB与DNA的结合可能特异性地影响了DNA的二级结构.
关键词：海美溴铵DNA荧光探针相互作用构型
分类号：R3(基础医学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 148-151 )
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