刺葡萄VdWRKY26基因克隆及功能分析
袁璐
晏芬茹
曾雅婷
谌碧琳
李水香
白描
谭君
罗飞雄
刘昆玉
杨国顺
李双江
湖南农业大学园艺学院·湖南省葡萄工程技术研究中心,长沙 410128;岳麓山实验室果树品种创制中心,长沙 410128
摘要:[目的]探究VdWRKY26基因在刺葡萄果实生长发育中的功能.[方法]从湘刺1号果实中克隆VdWRKY26基因CDS序列,并对其编码蛋白进行氨基酸多重序列比对及系统进化分析;构建VdWRKY26表达载体,并通过烟草瞬时转化法对VdWRKY26进行亚细胞定位分析;通过qPCR技术测定VdWRKY26在刺葡萄不同组织中的表达量;克隆Vd-WRKY26基因2545 bp的启动子序列,并通过GUS染色试验检测VdWRKY26启动子的活性;最后,通过农杆菌介导法获得VdWRKY26转基因葡萄41B细胞以探究其功能.[结果]成功克隆VdWRKY26的编码序列,其长度为1434 bp,编码477个氨基酸;亚细胞定位结果表明VdWRKY26主要定位于细胞核;qPCR分析表明,VdWRKY26在叶片和果实中的表达水平较高,而在根和茎中的表达水平相对较低;GUS染色分析发现,VdWRKY26基因起始密码子上游2545 bp的启动子区域具有活性;通过在葡萄41B悬浮细胞中同源表达VdWRKY26,初步揭示了其具有调控葡萄苹果酸积累的能力.[结论]成功克隆了VdWRKY26基因的CDS及启动子序列,并对其功能进行了系统分析.首次揭示了VdWRKY26在葡萄果实苹果酸积累中的正向调控作用,为解析葡萄果实风味品质形成的分子机制提供了重要理论依据.
关键词:刺葡萄VdWRKY26转录调控亚细胞定位启动子活性苹果酸
分类号:S663.1(果树园艺)
资助基金:国家重点研发计划(2023VFD1200100)现代农业产业技术体系(CARS-29-Zp-9)
论文发表日期:2026-03-10
在线出版日期:2026-04-08(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:14( 521-534 )
英文信息
