牛磺熊去氧胆酸通过调节内质网应激减轻脂多糖诱导的炎症损伤
廖慧云
方瑶
李茂玲
孟贝贝
唐琼
吴妍雯
刘海潮
胡振红
430070 湖北武汉,中部战区总医院呼吸与危重症医学科
摘要：目的 探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)抑制剂牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TUDCA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症损伤的影响.方法 将小鼠巨噬细胞系RAW 264.7按照不同干预因素分为对照组(细胞完全培养基培养)、LPS组(1 μg/ml LPS处理)、不同浓度TUDCA组(分别用100、200、500 μmol/L TUDCA 处理)、TUDCA+LPS 组(分别用 100、200、500 μmol/L TUDCA+1 μg/ml LPS 处理)、衣霉素(tuni-camycin,TM)组(5 mg/L TM处理)、TM+LPS组(5 mg/L TM+1 μg/ml LPS处理).干预结束后,使用细胞计数试剂盒(cell counting kit 8,CCK8)检测各组细胞的存活率;酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA))检测一氧化氮(nitric oxide,NO)、白细胞介素 1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平;实时荧光逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测ERS信号通路主要信号分子蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase-like endo-plasmic reticulum kinase,PERK)、激活转录因子 6(activated transcription factor 6,ATF6)、肌醇依赖性激酶 1α(inositol-requiring enzyme 1 alpha,IRE1α)/X 盒结合蛋白 1(X-box binding protein 1,XBP1)、结合免疫球蛋白(binding immuno-globulin protein,BIP)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的mRNA和蛋白表达情况;此外,使用透射电子显微镜观察细胞内质网的结构变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(terminal deoxynucl neotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling,TUNEL)染色评估细胞凋亡.结果 与对照组比较,不同浓度TUDCA组的细胞存活率差异无统计学意义(P均＞0.05),TUDCA+LPS组细胞存活率明显高于LPS组(P＜0.05).与对照组比较,LPS组巨噬细胞出现极化、胞内内质网扩张及自噬体形成,LPS组NO、IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著上升(P均＜0.05).与对照组比较,LPS组细胞凋亡率上升;与LPS组比较,TUDCA+LPS组细胞凋亡率降低(P＜0.05).与LPS组比较,TUDCA+LPS组细胞自噬体形成减少,内质网网腔缩小.与对照组比较,LPS和TM组BIP、CHOP、PERK、ATF6和XBP1的mRNA及其蛋白相对表达水平明显增加(P均＜0.001).与TM+LPS组和LPS组比较,TUDCA+LPS组BIP、CHOP、PERK、ATF6和XBP1的mRNA及其蛋白相对表达水平明显降低(P均＜0.001).结论 TUDCA可通过调节ERS减轻LPS诱导的细胞炎症损伤,发挥细胞保护作用.
关键词：慢性气道炎症性疾病牛磺熊去氧胆酸脂多糖内质网应激炎症
分类号：R363(病理学)
资助基金：湖北省自然科学基金面上项目(2025AFB706)武汉市中青年医学骨干人才工程(2020-55)
论文发表日期：2025-08-28
在线出版日期：2025-09-18（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 645-651 )
英文信息