RACK1干扰质粒的构建及其干扰效率的鉴定
邹晏1
鲁芳2
刘延友1
汪宇辉1
甘露1
付天明1
王正荣1
1.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院生物医学工程研究室,四川,成都,6100412.四川省人民医院检验科人类分子遗传中心,四川,成都,610072
摘要：目的 构建高效针对RACK1(Gnb211基因)的干扰质粒,为进一步研究RACK1功能构建有效平台.方法 采用M-folder生物软件选择2个Gnb211干扰位点,根据位点序列合成2个干扰片段及1个阴性对照片段,定向克隆入pGenesil-1干扰载体并测序验证.将干扰及对照质粒分别转染至NIH3T3细胞后,实时定量RT-PCR鉴定干扰效率.结果 实时定量RT-PCR结果显示,干扰质粒转染组的Gnb211 mRNA量分别为未转染组的58%和7%,阴性对照质粒转染组与未转染组一致,提示干扰质粒pGenesil-1/Gnb211-Ⅱ干扰效率达到90%以上.结论 成功构建并筛选到具有显著干扰效率的干扰质粒,为进一步研究RACK1及其伴侣分子的功能联系奠定了基础.
关键词：生物节律干扰质粒RNA干扰RT-PCRGnb211基因
分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 117-120 )
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