Grp78基因转染肝细胞癌SMMC-7721克隆筛选及鉴定
谷燕娇1
高志安1
苏荣健2
1.辽宁医学院附属第一医院病理科2.辽宁医学院科学实验中心,辽宁锦州,121001
摘要：目的 用Grp78基因转染人肝细胞癌SMMC-7721,筛选阳性克隆并鉴定.方法 利用真核表达载体pcDNA3.1+Grp78转染SMMC-7721,pcDNA3.1+Grp78与转染试剂的比例(μg/μL)分别为2:3、2:4、2:5、2:6、2:7、2:8、2:9,400 μg/mL G418筛选阳性克隆后,传代扩增,Western Blot鉴定克隆的Grp78表达情况.应用pcDNA3.1空载体作为阴性对照.结果 Western Blot显示,转染后的SMMC-7721经G418筛选,除一个克隆不高表达外,其余克隆均高表达Grp78.结论 Crp78转染SMMC-7721的最佳转染效率是8:2(转染试剂/DNA),由于假阳性克隆的存在,筛选后的克隆需要鉴定.
关键词：Grp78基因转染克隆筛选
分类号：R11735.2(卫生基础科学)
资助基金：辽宁省博士启动基金(20061074)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 393-396 )
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