腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-+VEGF121 -IRES-hrGFP-1的构建和鉴定
胡亮
李谌
刘丹平
1.辽宁医学院附属第一医院骨科,辽宁,锦州,1210012.辽宁医学院附属第一医院骨科,辽宁,锦州,1210013.辽宁医学院附属第一医院骨科,辽宁,锦州,121001
摘要：目的 构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-+VEGF121-IRES-hrGFP-1,为构建表达具有抗原表位标记的血管内皮生长因子121(vascular endothelial growth factor 121,VEGF121),并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础.方法 对目的 基因供体质粒pTG19T-VEGF121携带的VEGF121基因测序和序列内部存在的限制性内切酶识别位点进行分析,利用PCR(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术对pTG19T-VEGF121携带的VEGF121基因突变,以去除翻译终止密码子后的基因序列并在序列前后分别添加新的NotI和XhoI酶切位点.将突变后的VEGF121,基因(+VEGF121)定向连入腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-IRES-hrGFP-1,通过电泳和测序鉴定获得的重组质粒.结果 重组质粒经电泳和测序鉴定为正确克隆.结论 成功构建了pShuttle CMV-+VEGF)(121)IRES-hrG-FP-1.
关键词：腺病毒穿梭载体血管內皮生长因子121
分类号：R317.3(医用一般科学)
资助基金：辽宁省教育厅创新团队项目(2007T109)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 488-490 )
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