血府逐瘀胶囊治疗APAP诱导的药物性肝损伤的机制研究
范振立
方伟
锦州医科大学研究生培养基地(重庆大学附属三峡医院药学部),重庆 404000
摘要：目的 基于网络药理学、分子对接和动物实验探究血府逐瘀胶囊治疗对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的药物性肝损伤的作用机制.方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)和本草组鉴数据库(herbal medicine database,HERB)筛选血府逐瘀胶囊活性成分,经过SwissADME、Swiss Target Prediction数据库筛选和预测其对应靶点.通过人类基因数据库(GeneCards)、孟德尔遗传在线数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)、疾病基因网络(database of gene-disease associations,DisGeNET)获取药物性肝损伤的相关靶点.将药物与疾病的交集靶点导入STRING数据库构建蛋白质一蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络模型,在Cytoscape3.9.1中进行拓扑学参数分析.借助基因功能注释与整合发现数据库(database for annotation,visualization and integrated discovery,DAVID)对交集靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,采用CB-Dock2在线分子对接服务器进行分子对接验证.动物实验验证网络药理学预测结果,采用APAP构建药物性肝损伤小鼠模型,分别给予不同剂量的血府逐瘀胶囊进行干预.苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝组织病理学变化,采用微板法测定血清生化指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆红素(total bilirubin,TBIL),酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肝组织氧化因子超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),利用蛋白质印迹(Western Blot)法检测磷脂酰肌醇 3-激酶-蛋白激酶 B(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路关键蛋白的表达.结果 筛选出血府逐瘀胶囊活性成分158个,潜在靶点914个,药物性肝损伤疾病靶点1657个,交集靶点348个,PPI网络分析筛选出核心靶点67个,包括蛋白激酶Bl(AKT1)、白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子(TNF)、肿瘤蛋白p53(TP53)、白细胞介素1β(IL1β)、表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、胱天蛋白酶3(CASP3)、B淋巴细胞瘤-2(BCI2)、原癌酪氨酸蛋白激酶(SRC)等.KEGG富集分析表明,血府逐瘀胶囊的作用主要是通过多种生物通路来实现的,包括癌症相关通路、代谢通路、PI3K-AKT信号通路和MAPK信号通路等.分子对接结果表明,血府逐瘀胶囊中主要活性成分槲皮素、山奈酚、黄芩素、β-谷甾醇、豆甾醇、异鼠李素、柚皮素、木犀草素与靶点AKT1、IL6、TNF、TP53、IL1β、EGFR结合良好.动物实验表明,血府逐瘀胶囊降低血清ALT、AST、ALP、TBIL及肝组织炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,升高肝组织氧化因子SOD、CAT、GSH水平,降低MDA水平.Western Blot结果显示,血府逐瘀胶囊降低PI3K-AKT和MAPK信号通路中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-P38)蛋白表达水平.结论 本研究通过网络药理学、分子对接与动物实验相结合的方法证实血府逐瘀胶囊通过多组分、多靶点、多通路发挥抗对乙酰氨基酚诱导的肝损伤的作用,其机制可能为抑制PI3K-AKT和MAPK信号通路相关蛋白表达来调节对乙酰氨基酚刺激引起的氧化应激、炎症反应.
关键词：血府逐瘀胶囊对乙酰氨基酚网络药理学药物性肝损伤信号通路
分类号：R285.5(中药学)
论文发表日期：2025-12-30
在线出版日期：2026-04-02（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：13( 7-18,26 )
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