Derlin-1通过调控PI3K/Akt信号通路与自噬促进下咽癌紫杉醇耐药的实验研究
邓亚萍
谭凤武
黎可华
株洲市中心医院耳鼻咽喉头颈外科,湖南 株洲 412000
摘要：目的 探讨内质网相关降解蛋白 1(Derlin-1)在下咽癌紫杉醇耐药性形成中的作用及其对PI3K/Akt信号通路和自噬的调控机制.方法 采用紫杉醇梯度诱导构建耐药下咽癌Fadu细胞株,通过CCK-8 测定半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI).实验分为对照组、紫杉醇组(80 nmol/L)、Derlin-1 沉默组(siRNA干扰)、Derlin-1 沉默+紫杉醇组.采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测Derlin-1、Bax、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、LC3-Ⅱ/Ⅰ及Beclin-1蛋白表达;mCherry-GFP-LC3B双荧光腺病毒结合共聚焦显微镜观察自噬体及自噬溶酶体形成.结果 耐药细胞IC50由亲本细胞的 8.438 nmol/L升至 73.330 nmol/L,RI为 8.69,且Derlin-1 蛋白表达明显上调.紫杉醇组细胞活力下降至约65%,凋亡率约 18.6%;Derlin-1沉默+紫杉醇组细胞活力进一步降至约 42%,凋亡率升至约 36.2%.与对照组比较,紫杉醇组Bax升高、Bcl-2下降,p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1 升高;在Derlin-1 沉默+紫杉醇组中,这些差异均较紫杉醇组更大,表现为Bax进一步升高、Bcl-2进一步下降,PI3K/Akt信号通路磷酸化水平更低,自噬相关蛋白表达更高,自噬体与自噬溶酶体数量显著增多.结论 Derlin-1可能通过激活PI3K/Akt信号通路及调控自噬过程促进下咽癌对紫杉醇的耐药性,沉默Derlin-1表达可逆转耐药表型,并增强紫杉醇诱导的细胞凋亡和自噬,提示Derlin-1 可能作为克服耐药的潜在治疗靶点.
关键词：下咽癌内质网相关降解蛋白1紫杉醇PI3K/Akt信号通路自噬
分类号：R739.63(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：湖南省自然科学基金科卫联合资助项目(2022JJ70171)
论文发表日期：2025-09-28
在线出版日期：2025-10-28（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 833-838 )
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