胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3对食管癌细胞恶性表型的影响
常绘文
施我大
施展
张亚军
江苏省盐城市第三人民医院心胸外科,江苏 盐城 224005
摘要：目的 探讨胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)对食管癌细胞恶性表型的影响及其上游调控机制.方法 生信分析工具结合实时荧光定量PCR、蛋白质印迹(Western blot)检测IGF2BP3、双加氧酶10-11易位蛋白1(TET1)的表达,并分析公共数据库中IGF2BP3与TET1表达的相关性.在转染IGF2BP3特异性小干扰RNA(siRNA;si-IGF2BP3组)和阴性对照siRNA(si-NC组)的食管癌细胞TE-15和ESC-410中,分别通过细胞计数试剂盒-8、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)和Transwell迁移与基质胶侵袭实验评估细胞活力、增殖能力和迁移侵袭能力,并利用流式细胞术测定细胞凋亡情况;采用Western blot检测Ki67、基质金属蛋白酶(MMP)-7/9、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)以及切割型caspase3(CC3)的蛋白表达水平.在转染TET1过表达质粒(Oe-TET1组)与空载体质粒(Oe-NC组)或TET1特异性siRNA(si-TET1组)与si-NC组的食管癌细胞中,利用Western blot和RNA甲基化免疫共沉淀技术评估了IGF2BP3的蛋白表达水平和N6-甲基腺苷(m6A)甲基化程度.结果 食管癌组织中IGF2BP3和TET1的表达较正常组织均显著上调(P<0.001),且两者表达呈显著正相关(r=0.220,P<0.001).在食管癌细胞系(Eca-109、TE-1、EC-1、ESC-410)中,IGF2BP3和TET1的mRNA和蛋白表达水平均显著高于人正常食管上皮细胞HET-1A,其中TE-15和ESC-410细胞中的表达水平最高(P<0.001).与si-NC组相比,si-IGF2BP3组细胞的增殖活性显著降低,EdU阳性率下降,迁移侵袭能力减弱,细胞凋亡率显著升高(P<0.001).在蛋白水平上,si-IGF2BP3组中Ki-67、MMP-7、MMP-9和Bcl-2的表达下调,而Bax和CC3的表达上调(P<0.001).与Oe-NC组相比,Oe-TET1组细胞中IGF2BP3的m6A甲基化水平和蛋白表达均显著升高;而与si-NC组相比,si-TET1组细胞中IGF2BP3的m6A甲基化水平和蛋白表达均显著降低(P<0.001).结论 TET1在食管癌中可能通过增强IGF2BP3的m6A甲基化修饰促进其表达,进而驱动食管癌细胞的恶性进展.TET1/IGF2BP3轴有望成为食管癌的潜在治疗靶点.
关键词：食管癌胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3双加氧酶10-11易位蛋白1恶性表型
资助基金：江苏省卫生健康委科研项目(M2021089)
论文发表日期：2025-10-28
在线出版日期：2025-12-03（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 937-943 )
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