RP11-757G1.5对胃癌细胞生物学行为及顺铂敏感性的影响
商颖
赵荣坤
尹乐
孙佳兴
徐飞
苗丽丽
承德市第三医院检验科,河北 承德 067000
摘要:目的 探讨长链非编码RNA RP11-757G1.5对胃癌细胞生物学行为及顺铂敏感性的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃上皮细胞GES-1和人胃癌细胞(MKN-45、NCI-N87、AGS和HGC-27)的RP11-757G1.5水平;设计并合成两条针对RP11-757G1.5的小干扰RNA(siRNA)序列(si-757G1.5#1与si-757G1.5#2)及阴性对照序列(si-NC),将其分别转染至MKN-45和HGC-27细胞,设立Control组、si-NC组及两个干扰组(si-757G1.5#1和si-757G1.5#2).为探究RP11-757G1.5对细胞生物学行为及药物敏感性的影响,分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力与顺铂的半数抑制浓度(IC50)、划痕实验评估细胞迁移能力、Transwell实验分析细胞侵袭能力,并通过蛋白质印迹(Western blot)检测基质金属蛋白酶2和9(MMP-2和MMP-9)的蛋白表达水平.结果 RT-qPCR检测结果显示,与正常胃上皮细胞GES-1相比,RP11-757G1.5在多种胃癌细胞系中表达均显著上调(P<0.05).选取其中表达水平最高的MKN-45和HGC-27细胞用于后续功能研究.在成功构建RP11-757G1.5敲低模型的基础上,CCK-8实验显示,与Control组和si-NC组相比,两个干扰组(si-757G1.5#1和si-757G1.5#2)的细胞增殖活力显著下降(P<0.05);同时,基于CCK-8法的药物敏感性检测表明,干扰组对顺铂的化疗敏感性明显增强,IC50值降低约2.3~2.7倍(P<0.05).此外,划痕实验与Transwell实验结果显示,干扰组的细胞迁移与侵袭能力亦受到显著抑制,具体表现为划痕愈合率与穿膜细胞数均明显减少(P<0.05).在机制层面,Western blot检测发现干扰组中MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平均显著下调(P<0.05).结论 RP11-757G1.5在胃癌中高表达,并通过调控MMP-2/9表达来促进肿瘤细胞的恶性表型,同时影响化疗敏感性,提示其可能成为胃癌治疗的新靶点.
关键词:胃癌长链非编码RNARP11-757G1.5细胞生物学行为顺铂敏感性
资助基金:承德市科技计划自筹经费项目(202204A137)
论文发表日期:2025-10-28
在线出版日期:2025-12-03(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 950-955 )
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