寻常型天疱疮患者血清对HaCaT细胞Dsg、MMP-9表达的影响
谢志敏1
潘乔林1
张怡2
沈旭成1
邓慧妍3
戴向农3
叶兴东3
1.广州医科大学皮肤病研究所2.广州市皮肤病防治所,广东 广州 5100953.广州医科大学皮肤病研究所;广州市皮肤病防治所,广东 广州 510095
摘要:目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者血清对HaCaT细胞桥粒芯蛋白(Dsg)1、3和基质金属蛋白酶(MMP)9表达的影响及其参与PV棘层松解的可能机制.方法:用含5%PV血清的高糖DMEM培养基孵育HaCaT细胞,以正常培养组、健康血清组以及抗Dsg3抗体组(阳性对照组)作为对照.刮取细胞提取总RNA及蛋白质,Q-PCR检测Dsg1、Dsg3和MMP-9 mRNA转录水平,Western Blot检测Dsg1、Dsg3和MMP-9表达,荧光单克隆Dsg1/3抗体分别检测细胞表面Dsg1、Dsg3表达.结果:Q-PCR结果显示:与正常培养组比较,含5%PV血清培养组HaCaT细胞Dsg1、Dsg3、MMP-9基因的mRNA相对表达量分别上升约432%、402%、402%,而抗Dsg3抗体组分别上升约495%、488%、604%,PV血清组与正常培养组间有明显差异(P值均<0.05).Western Blot结果显示:与正常培养组相比,PV血清组HaCaT细胞表面Dsg1、Dsg3、MMP-9蛋白表达升高.Dsg1、Dsg3荧光单克隆抗体检测显示:PV血清组HaCaT表面Dsg1线状荧光消失,替代为颗粒状、团块状荧光颗粒分散于细胞表面和胞浆区域,而细胞表面Dsg3线状荧光仍然存在,但强度减弱.结论:PV血清能促进Dsg1、Dsg3和MMP-9转录及表达,Dsg3抗体可通过诱导角质形成细胞Dsg1蛋白内吞,削弱抗体补偿作用参与棘层松解.
关键词:寻常型天疱疮基质金属蛋白酶桥粒芯糖蛋白内吞棘层松解
分类号:R758.66(皮肤病学与性病学)
资助基金:广州市科技计划(201904010352)
论文发表日期:2020-10-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 295-300,306 )
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