柚皮素通过调节HO-1/HIF-1α/VEGF轴改善糖皮质激素诱导的股骨头坏死机制研究
张新伟1
宋明1
朱洪勋2
戴守平2
张玉松2
韦标方2
1.广州中医药大学,广州 510006;广州中医药大学临沂市人民医院研究生培养基地,山东 临沂 27602.广州中医药大学临沂市人民医院研究生培养基地,山东 临沂 276000
摘要：目的 探讨柚皮素(NGN)治疗糖皮质激素诱导的激素性股骨头坏死(SONFH)的机制.方法 使用甲泼尼龙(MPS)处理构建SONFH大鼠模型,并行NGN及锌原卟啉(ZnPP)干预.采用Micro-CT分析股骨头组织形态学变化,检测大鼠血清骨钙素(OCN)及股骨头组织中血红素加氧酶-1(HO-1)、缺氧诱导因子-α(HIF-1α)水平.采用地塞米松(DEX)处理MC3T3-E1细胞构建细胞模型,随后进行NGN干预.生物信息学分析结合分子对接技术推定NGN的作用靶点,并行Pull-down实验验证.通过细胞转染敲低HO-1的表达.分析MC3T3-E1细胞活力、增殖、凋亡、迁移能力.采用血管生成实验评估人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的血管生成能力.结果 Micro-CT分析发现,较对照组,MPS组大鼠骨小梁厚度、骨小梁数量明显降低,而骨表面积/骨体积比和骨小梁分离度显著增加(P<0.001).体外实验结果表明,DEX可抑制MC3T3-E1细胞增殖,促进细胞凋亡,并增加活性氧生成(P<0.01);DEX抑制成骨分化相关指标矿化结节形成及成骨相关基因(Runt相关转录因子2、骨桥蛋白、骨钙素)的表达(P<0.01);然而,NGN处理部分逆转了上述影响.DEX显著抑制HUVECs迁移、血管生成和血管生成相关标志物(血小板内皮细胞黏附因子-1、血管内皮生长因子和血管性血友病因子)的表达(P<0.01),然而,NGN处理对上述效应无显著影响,但NGN条件培养基[CM(NGN)]处理部分逆转了上述效应(P<0.01).生物信息学分析结合Pull-down实验结果表明,HO-1是NGN的作用靶点.DEX处理显著下调HO-1的表达,而NGN干预部分抵消DEX诱导的抑制效应(P<0.01).HO-1敲低抵消了NGN的治疗效果(P<0.01).与MPS单独给药相比,NGN和MPS联合给药上调大鼠股骨头组织中HO-1和HIF-1α的表达,而HO-1抑制剂ZnPP进一步上调HO-1的表达,但下调HIF-1α蛋白水平(P<0.01).结论 NGN通过激活HO-1的表达和活性,调节HIF-1α/VEGF通路促进成骨细胞分化、骨形成和血管生成,发挥对SONFH的治疗作用.
关键词：激素性股骨头坏死柚皮素血红素加氧酶-1成骨相关基因成骨分化缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子通路
资助基金：山东省科技发展计划(2014CSF119022)
论文发表日期：2025-11-28
在线出版日期：2025-12-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：12( 769-779,792 )
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