基于转录组学探究贝母素乙抑制胶质瘤细胞恶性生物学行为的作用机制
毛兴允1
郭玲娣2
王立峰3
李瑞国4
王一鸣5
衡雪源6
李丽7
1.广州中医药大学山东省临沂市人民医院研究生培养基地 临沂市人民医院儿外科一病区,山东 临沂 276002.临沂市人民医院产科,山东 临沂 2760003.临沂市人民医院麻醉科,山东 临沂 2760004.临沂市人民医院儿童保健科,山东 临沂 2760005.临沂市人民医院儿外科一病区,山东 临沂 2760006.临沂市人民医院神经外科,山东 临沂 2760007.临沂市人民医院新生儿科,山东 临沂 276000
摘要：目的 探究天然产物贝母素乙对人脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的抑制作用,并基于转录组学分析阐明其作用机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度贝母素乙对人脑胶质瘤细胞系U251、LN229细胞活力的影响,计算半数抑制浓度(IC50),并选取近IC50浓度(U251细胞:80 μmol/L、LN229细胞:110 μmol/L)作为有效干预浓度.通过克隆形成、细胞划痕及Transwell实验评估贝母素乙对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测其诱导的细胞凋亡情况.对经贝母素乙处理的U251细胞进行转录组学测序,筛选差异表达基因,并进行GO富集与KEGG富集分析.Western blot实验验证关键基因RHOU表达.构建RHOU稳定沉默细胞系,联合贝母素乙处理后,采用流式细胞术探究RHOU在其诱导凋亡中的作用;行GSEA分析和RT-qPCR验证RHOU对下游E2F信号通路关键分子的调控作用.结果 贝母素乙以剂量依赖性方式显著抑制U251和LN229细胞的活力,且有效抑制胶质瘤细胞的克隆形成、迁移及侵袭能力,并显著诱导了细胞凋亡.转录组学分析共鉴定出1 507个差异表达基因,主要富集于细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡及细胞黏附等通路,其中RHOU表达下调尤为显著.Western blot实验验证经贝母素乙处理后,RHOU蛋白表达显著降低(P<0.01).沉默RHOU可增强贝母素乙诱导的细胞凋亡效应.基于RHOU表达水平的GSEA分析显示E2F信号通路显著富集,沉默RHOU可显著下调E2F通路关键基因E2F1、CCND1和CCNE1的mRNA表达水平.结论 贝母素乙显著下调关键基因RHOU表达,进而抑制下游E2F信号通路的活性,最终阻断胶质瘤细胞的恶性生物学进程.
关键词：胶质瘤贝母素乙RHOUE2F信号通路细胞恶性生物学行为
资助基金：山东省中医药科技面上项目(M-2022103)山东第二医科大学附属医院(教学医院)科研发展基金项目(2025FYM066)
论文发表日期：2025-12-28
在线出版日期：2026-01-13（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 867-873 )
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