3-甲氧基酪胺噬菌体抗体的制备及应用
张航1
李娅娅2
张伟涛2
李松瑞2
刘雅琳2
田晓平2
李桂林2
姬国杰3
胡焕焕3
赵巧辉2
1.喀什大学生命与地理科学学院新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室,新疆维吾尔自治区喀什 844000;郑州伊美诺生物技术有限公司,郑州 4500002.郑州伊美诺生物技术有限公司,郑州 4500003.豫北医学院生命科学技术学院生育力保存重点实验室,河南新乡 453003
摘要：目的 寻找能够特异性检测尿液中3-甲氧基酪胺的单克隆抗体,以满足3-甲氧基酪胺诊断试剂盒开发需要.方法 设计并合成3-甲氧基酪胺抗原,通过3-甲氧基酪胺偶联双琥珀酰亚胺辛二酸酯钠盐和钥孔血蓝蛋白免疫新西兰大白兔获取抗体库,基于噬菌体展示技术,通过固相淘选策略获得高亲和力噬菌体抗体,同时依靠标记生物素抗体包被磁微粒,结合辣根过氧化物酶标记抗原,验证抗体性能.结果 获得20株与3-甲氧基酪胺有较高亲和性的噬菌体抗体,经酶联免疫吸附试验效价测定从中筛选出效价和斜率最优的重组抗体4354#,并以重组抗体4354#偶联生物素为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的经酰化3-甲氧基酪胺作为酶标抗原,通过磁微粒化学发光法验证重组抗体4354#可用于检测经酰化处理尿液中3-甲氧基酪胺的含量.测试结果与高效液相色谱法检测结果呈现正相关(R2=0.902 1).结论 通过噬菌体展示技术,成功筛选出针对3-甲氧基酪胺的重组抗体,并通过磁微粒化学发光法验证其可用于检测尿液中3-甲氧基酪胺的含量,为3-甲氧基酪胺诊断试剂盒原材料的开发奠定了基础.
关键词：3-甲氧基酪胺噬菌体展示技术重组抗体尿液生物标志物磁微粒化学发光法
资助基金：生物医药特色行业学院培养卓越工程师的探索与实践(2024SJGLX0627)
论文发表日期：2026-02-28
在线出版日期：2026-03-23（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 109-116 )
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