基于AP-1/miR-155信号通路探讨阿霉素影响幼鼠血脑屏障完整性的机制
胡南
尹毅青
张瑜
王捷夫
天津医科大学肿瘤医院 国家肿瘤临床研究中心,天津 300060;天津市肿瘤防治重点实验室,天津 300060;天津市恶性肿瘤临床医学研究中心,天津 300060
摘要：目的 观察阿霉素(DOX)对幼鼠血脑屏障(BBB)完整性的影响,并探讨其可能的机制.方法 在体实验:采用随机数字法将96只幼鼠分为对照1组(C1组)、DOX1组(D1组)、DOX+微小核糖核酸155(miR-155)拮抗剂1组(D+L1组)、DOX+激活蛋白1(AP-1)抑制剂1组(D+S1组)、miR-155拮抗剂1组(L1组)、AP-1抑制剂1组(S1组),每组16只.D1组给予腹腔注射DOX(4 mg/kg);D+L1组给予腹腔注射锁核酸(LNA)修饰的miR-155拮抗剂(LNA-antimiR-155)(5 mg/kg),1 h后腹腔注射DOX(4 mg/kg);D+S1组给予腹腔注射AP-1抑制剂SP600125(10 mg/kg),1 h后腹腔注射DOX(4 mg/kg);L1组给予腹腔注射LNA-antimiR-155(5 mg/kg);S1组腹腔注射SP600125(10 mg/kg).均每周1次,干预5周.伊文思蓝(EB)染色法观察BBB完整性,Western blotting法检测海马组织紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5表达.离体实验:将幼鼠脑微血管内皮细胞系bEnd.3细胞分为与在体实验对应的C2、D2、D+L2、D+S2、L2、S2 组,C2 组常规培养,无药物干预;D2 组加入DOX(1 µmol/L)干预 48 h;D+L2 组加入LNA-antimiR-155(50 nmol/L)预处理,24 h后加入DOX(1 µmol/L)干预48 h;D+S2组加入AP-1抑制剂SR11302(50 µmol/L)预处理,24 h后加入DOX(1 µmol/L)干预48 h;L2组单独用LNA-antimiR-155(50 nmol/L)干预24 h;S2组单独用SR11302(50 µmol/L)干预24 h.免疫荧光染色法检测细胞中膜联蛋白A1表达量,实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中miR-155表达,Western blotting法检测c-Jun蛋白表达反映AP-1活性.结果 在体实验结果:与C1组比较,D1组幼鼠海马组织中EB含量高(P<0.05);与D1组比较,D+L1组、D+S1组、L1组、S1组幼鼠海马组织EB含量低(P均<0.05).与C1组比较,D1组幼鼠脑组织Occludin、Claudin-5蛋白相对表达量低(P均<0.05);与D1组比较,D+L1组、D+S1组、L1组、S1组幼鼠脑组织Occludin、Claudin-5蛋白相对表达量高(P均<0.05).离体实验结果:与C2组比较,D2组、D+L2组、D+S2组幼鼠脑微血管内皮细胞中膜联蛋白A1表达量低(P均<0.05);与D2组比较,D+S2组、D+L2组、L2组、S2组幼鼠脑微血管内皮细胞中膜联蛋白A1表达量高(P均<0.05).与C2组比较,D2组幼鼠微血管内皮细胞中miR-155相对表达量高(P<0.05);与D2组比较,D+L2组、D+S2组、L2组、S2组幼鼠微血管内皮细胞中miR-155相对表达量低(P均<0.05).与C2组比较,D2组、D+L2组幼鼠脑微血管内皮细胞c-Jun蛋白相对表达量高(P均<0.05),D+S2组、S2组幼鼠脑微血管内皮细胞c-Jun蛋白相对表达量低(P均<0.05);与D2组比较,D+S2组、L2组、S2组脑微血管内皮细胞c-Jun蛋白相对表达量低(P均<0.05).结论 DOX可能通过调控AP-1、miR-155表达以抑制膜联蛋白A1的表达和紧密连接蛋白的合成,从而破坏幼鼠BBB的完整性.
关键词：认知功能障碍化学疗法阿霉素血脑屏障激活蛋白1微小核糖核酸155膜联蛋白A1幼鼠
分类号：R453(治疗学)
资助基金：国家自然科学基金(81701081)
论文发表日期：2025-11-25
在线出版日期：2025-12-09（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 42-47 )
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