热灭活处理对新型冠状病毒鼻咽拭子核酸检测质量的影响
曹娴
浦晓红
许晔琼
赵一琳
俞建峰
陈洁
宛传丹
215500 江苏常熟,常熟市医学检验所质量管理科
摘要：目的 探讨新型冠状病毒(2019-nCoV)检测前热灭活处理对核酸稳定性和检测质量的影响.方法 收集2020年2—7月常熟市医学检验所接收的2019-nCoV核酸阳性标本,检验操作严格按照三级生物安全防控进行前处理分装.标本分为未灭活组(20份)和热灭活组(30份),未灭活组根据不同待检时长分为2 h组、8 h组、24 h组、48 h组,每组5份;热灭活组分为热灭活组1(56℃,30 min)、热灭活组2(56℃,60 min)、热灭活组3(56℃,2 h),每组10份.采用全自动核酸提取仪提取核酸后,以双重荧光反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2019-nCoV的ORF1ab基因和N基因片段.阳性将呈典型S形曲线扩增,记录并比较各组基线与曲线指数增长拐点所对应的循环数(CT值).结果 热灭活组1、热灭活组2、热灭活组3的ORF1ab基因和N基因CT值均明显高于未灭活组(ORF1ab基因:30.5±0.4、32.3±0.4、36.1±0.5比27.3±0.3,N基因:30.1±0.6、34.1±0.5、37.2±0.5比27.2±0.4,均P<0.05).未灭活组待检时长2 h、8 h、24 h、48 h组的ORF1ab基因和N基因CT值比较差异均无统计学意义(ORF1ab基因:28.3±0.5、29.5±0.3、29.4±0.3、30.2±0.7,N基因:26.5±0.3、27.3±0.4、27.1±0.5、28.7±0.7,均P>0.05).热灭活组1、2、3对高浓度核酸(5×105个拷贝/mL)的CT值均明显高于未灭活组(ORF1ab基因:31.5±0.3、33.3±0.4、37.3±0.6比26.3±0.3,N基因:31.1±0.7、34.2±0.5、38.8±0.3比25.2±0.4,均P<0.05).结论 热灭活处理可影响2019-nCoV核酸的稳定性,降低ORF1ab基因和N基因的扩增CT值.48 h内待检时长对ORF1ab和N基因的扩增CT值无显著影响.2019-nCoV核酸筛查应加强三级防护,避免热灭活处理,有利于提高2019-nCoV阳性样本的筛查效率.
关键词：新型冠状病毒热灭活核酸检测反转录聚合酶链反应
资助基金：江苏省常熟市科技发展计划(社会发展)项目(CS202013,CS202113)
论文发表日期：2022-09-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 263-266 )
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